应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 有关蛋白纯化的问题
121/2返回列表12下一页
查看: 2555  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

flll2014

铜虫 (小有名气)

[交流] 有关蛋白纯化的问题 已有5人参与

我是做蛋白纯化的新手，请问下，我用tris缓冲液过镍柱纯化蛋白质后，再用PBS脱盐，这样可行吗，还有PD10脱盐时会把氯化钠给脱去吗，那脱完后的溶剂里面是不是就没有盐离子了呢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-08-10 20:17:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

jiangdaohang

禁虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
2楼2014-08-10 21:53:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

wolfman840

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
youlinglyw: 金币+3 2014-08-12 23:25:04
纯化蛋白后的脱盐其实更准确说是叫作缓冲液置换，主要是考虑蛋白稳定性，一般来说，如果洗脱溶液会造成蛋白失活，就必须要进行缓冲液置换。一般置换，不会脱去所有离子，例如你用PBS去置换tris，置换率低的话，可能还有10%的tris在里面，但是不影响PBS对于蛋白质的缓冲作用。
所以脱盐更多是置换，不是把盐离子去除。
赞一下 回复此楼
3楼2014-08-11 10:26:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

salanero2000

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
脱盐是层析还是透析呢？层析如果柱子够长够大，脱的会比较干净。
PD10是个啥？
赞一下 回复此楼
4楼2014-08-11 17:04:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

flll2014

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wolfman840 at 2014-08-11 10:26:26
纯化蛋白后的脱盐其实更准确说是叫作缓冲液置换，主要是考虑蛋白稳定性，一般来说，如果洗脱溶液会造成蛋白失活，就必须要进行缓冲液置换。一般置换，不会脱去所有离子，例如你用PBS去置换tris，置换率低的话，可能 ...

谢谢，不过脱盐柱子好像主要是除去咪唑的
赞一下 回复此楼
5楼2014-08-12 20:14:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

flll2014

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by salanero2000 at 2014-08-11 17:04:27
脱盐是层析还是透析呢？层析如果柱子够长够大，脱的会比较干净。
PD10是个啥？

PD10是脱盐柱子，脱盐是层析的，大约有10厘米长的
赞一下 回复此楼
6楼2014-08-12 20:22:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凌波丽

专家顾问 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
脱盐还是除去咪唑等疏水小分子，最好直接用超滤和透析，用分子筛层析更换缓冲溶液可以，脱盐理论上可行，实际上效率比超滤和透析要低。
赞一下 回复此楼
7楼2014-08-13 00:21:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

flll2014

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 凌波丽 at 2014-08-13 00:21:53
脱盐还是除去咪唑等疏水小分子，最好直接用超滤和透析，用分子筛层析更换缓冲溶液可以，脱盐理论上可行，实际上效率比超滤和透析要低。

哦，好的，谢谢
回复此楼
8楼2014-08-13 10:39:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

flll2014

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 凌波丽 at 2014-08-13 00:21:53
脱盐还是除去咪唑等疏水小分子，最好直接用超滤和透析，用分子筛层析更换缓冲溶液可以，脱盐理论上可行，实际上效率比超滤和透析要低。

超滤好像对蛋白损伤比较大吧
赞一下 回复此楼
9楼2014-08-16 15:13:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

flll2014

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wolfman840 at 2014-08-11 10:26:26
纯化蛋白后的脱盐其实更准确说是叫作缓冲液置换，主要是考虑蛋白稳定性，一般来说，如果洗脱溶液会造成蛋白失活，就必须要进行缓冲液置换。一般置换，不会脱去所有离子，例如你用PBS去置换tris，置换率低的话，可能 ...

谢谢，我脱盐柱要是为了除咪唑，就是不确定会不会把氯化钠去除，如果没有氯化钠了，那么蛋白质可能会不稳定。
赞一下 回复此楼
10楼2014-08-16 15:16:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 flll2014 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 00:12 by vZfe6xYu34yj
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-14 23:45 by vZfe6xYu34yj
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 5/250 2026-09-14 23:13 by vZfe6xYu34yj
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 6/300 2026-09-14 22:37 by vZfe6xYu34yj
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:25 by vZfe6xYu34yj
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 3/150 2026-09-14 22:24 by vZfe6xYu34yj
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:01 by vZfe6xYu34yj
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:00 by vZfe6xYu34yj
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:36 by vZfe6xYu34yj
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:24 by vZfe6xYu34yj
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组招收博士研究生 +4 两三岁ss 2026-09-14 4/200 2026-09-14 20:29 by 班主任的同桌
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-14 18:01 by Aj1rhIDL5ixY
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-14 17:48 by Aj1rhIDL5ixY
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:13 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:37 by Aj1rhIDL5ixY
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 15:09 by Aj1rhIDL5ixY
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 14:57 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 西北工业大学材料学院电化学传感与催化课题组招收2027年推免研究生、博士生、博士后 +3 马方园 2026-09-10 4/200 2026-09-14 09:29 by Chem张zz
[考博] 27秋季材料博士申请求助 10+3 Cahal1 2026-09-11 4/200 2026-09-14 08:50 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 面上有专家说实验设备不是我们单位的 +6 zj_muchong 2026-09-08 8/400 2026-09-11 06:56 by suifengdao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭