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dengchun14

金虫 (正式写手)

[求助] 离子交换层析纯化蛋白质 已有4人参与

在采用Tris为缓冲液阴离子流穿后,可不可以直接上阳离子层析吸附结合?但是我看书上说最好阳离子层析用阴离子缓冲液,而tris是阳离子,还是说只用把平衡缓冲液改成阴离子缓冲液,样品不用置换成阴离子缓冲液也可以呢
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suwc2013

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
137167741: 金币+1, 小木虫交流,共同进步~~ 2014-01-25 21:17:18
dengchun14: 金币+1, 有帮助 2014-01-27 09:17:11
要是你的阴离子柱没有结合  可以直接上阳离子柱  我们以前经常这么干
。。。。。。。。
2楼2014-01-25 16:05:57
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
137167741: 金币+1, 小木虫交流,共同进步~~ 2014-01-25 21:17:25
在尝试方法阶段,最好是严格按照要求来做,不然成功或者失败了也不知道为什么,下次再做,如果结果不能重现也不知道为什么。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
3楼2014-01-25 19:12:55
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greenstone5389

铁杆木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以,但是tris 平衡buffer浓度不要超过20mM
4楼2014-01-27 10:23:23
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幻流心魇

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

可以  同时要考虑缓冲液的浓度,PH值。选用高于目的蛋白等电点的pH值缓冲液,目的蛋白带负电,可用阴离子交换柱纯化;选用低于目的蛋白等电点的pH值缓冲液,目的蛋白带正点,可用阳离子交换柱来纯化。
5楼2014-02-10 12:25:01
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