| 查看: 2581 | 回复: 9 | ||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | ||
[求助]
蛋白质纯化凝胶层析
|
||
|
我准备用凝胶层析的方法来纯化目标蛋白，计划要用S-200，不知上样时，要一次至少要上多少毫克的蛋白质溶液才行？多少毫升？每毫升多少毫克？ 同时想问一下，S-200装柱时一定要一次性全装上才行吗？我的实验室是没有泵的，只能手工装？ 蛋白质溶液是不是一定要垂直加入胶上？那么缓冲液也要直加入胶上吗？还有加入液体的上管道最远能够离胶面多远？如果胶上表面 积水过多，会不会影响结果？ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有222人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 急求关于蛋白纯化技术原理
已经有5人回复
- 凝胶层析图谱问题
已经有23人回复
- 蛋白质纯化与鉴定实验指南[l冷泉港]中译本
已经有661人回复
- 请帮忙推荐下蛋白电泳装置， 或洒点蛋白纯化 or PAGE 经验啊！
已经有8人回复
- 蛋白纯化分离问题
已经有19人回复
- 关于细菌蛋白质分离纯化
已经有8人回复
- 关于蛋白分离纯化实验设计思路！！！！！！！急急急
已经有11人回复
- 【求助/交流】做蛋白质纯化的来帮个忙
已经有16人回复
3楼2011-12-08 09:32:14
lihuan0525
金虫 (职业作家)
- 应助: 565 (博士)
- 金币: 2145
- 散金: 687
- 红花: 15
- 帖子: 3299
- 在线: 551.8小时
- 虫号: 1292024
- 注册: 2011-05-11
- 性别: GG
- 专业: 蛋白质组学
2楼2011-12-08 08:55:47
4楼2011-12-08 14:41:08
5楼2011-12-09 11:03:53
6楼2011-12-09 16:47:02
acehanhan
金虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 1870.3
- 散金: 60
- 帖子: 67
- 在线: 39.2小时
- 虫号: 1057477
- 注册: 2010-07-14
- 专业: 生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+5): Good!说得很细致了！ 2011-12-11 17:52:44
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+5): Good!说得很细致了！ 2011-12-11 17:52:44
|
在一定的上样量中，蛋白质的浓度高点好，没有具体要求，因为分子筛有对样品会有稀释作用。样品浓度低的话层析后更低。 上样前要让缓冲液刚刚流入凝胶，表面保留一点点（不能让胶进入空气），关闭开关； 将样品液用滴灌缓缓加入柱中，打开开关，让样品溶液也是刚刚进入柱中（柱表面也是保留一点点），关闭开关； 再缓缓加入洗脱液覆盖凝胶表面，然后接上洗脱液进行洗脱。 整个操作过程液体表面不能低于凝胶柱的表面。柱头及整个柱子在层析过程中均为垂直。 |
7楼2011-12-11 08:35:04
8楼2011-12-12 20:06:27
acehanhan
金虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 1870.3
- 散金: 60
- 帖子: 67
- 在线: 39.2小时
- 虫号: 1057477
- 注册: 2010-07-14
- 专业: 生物化学
9楼2011-12-13 15:36:21
10楼2012-02-28 10:59:29
