24小时热门版块排行榜    

查看: 3261  |  回复: 9
本帖产生 1 个 MolEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

BIO-che

新虫 (小有名气)

[求助] 蛋白质纯化凝胶层析

我准备用凝胶层析的方法来纯化目标蛋白,计划要用S-200,不知上样时,要一次至少要上多少毫克的蛋白质溶液才行?多少毫升?每毫升多少毫克?
同时想问一下,S-200装柱时一定要一次性全装上才行吗?我的实验室是没有泵的,只能手工装?
蛋白质溶液是不是一定要垂直加入胶上?那么缓冲液也要直加入胶上吗?还有加入液体的上管道最远能够离胶面多远?如果胶上表面 积水过多,会不会影响结果?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cai198559

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): Good! 2011-12-08 19:05:32
自己装的柱,分辨率较预装柱差点,上样体积一般是柱体积的2-5%较合适,蛋白总量会影响分辨率的,总量太高,有可能会使你的蛋白纯化效果偏差,这取决于你要纯化前蛋白的纯度。
4楼2011-12-08 14:41:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


西瓜(金币+1): Good! 2011-12-08 19:04:38
你可以买预装柱啊,没有泵能装好吗,装不好的话做了也没有效果,一般凝胶过滤的话上样量为柱体积的5%,脱盐的话可以多上的。
2楼2011-12-08 08:55:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lpw106

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5, MolEPI+1): Good!欢迎常来哦~ 2011-12-08 19:05:10
BIO-che(金币+2): 不错 2011-12-16 21:12:17
分子筛吗?
1、分子筛的上样对蛋白量和浓度没有特别要求,一般关注上样体积(不超过5%),如果你想峰高点,可把蛋白总量提高点;
2、为了避免重力扩散,所有操作一般是up方向;
3、分子筛对柱效要求较高,如果你没有纯化系统来装,可能装出来的柱效也不好,分离效果也不好,建议先用预装柱试。
3楼2011-12-08 09:32:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lpw106

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

谢谢,在这个平台里大家相互学习,谢谢
5楼2011-12-09 11:03:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 15/750 2026-09-01 12:23 by icm639
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +8 ziyangfang 2026-08-25 11/550 2026-09-01 09:51 by zzuzxg
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 5/250 2026-08-31 14:40 by hahaboy
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 基金不中,共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
信息提示
请填处理意见