24小时热门版块排行榜    

查看: 1378  |  回复: 6

gogoxiaobai

金虫 (小有名气)


[交流] 有关离子交换层析的问题

我最近在做离子交换层析初步分离纯化多肽,开始用了Q Sepharose Fast Flow分离,但是梯洗得到的肽组分活性最高只有30%,而上样峰的活性差不多达到30%—40%,后来考虑用SP Sepharose Fast Flow分离纯化,但是这个填料更不适合,梯洗后组分的活性基本没有,活性全在上样峰里,我想请教各位高手,我是该用Q Sepharose Fast Flow继续分离纯化?还是不用离子交换层析这一步,直接做下一步G-25凝胶脱盐?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gogoxiaobai(金币+1): 谢谢参与
一步分离纯化得到纯品的可能性很小,如果楼主的活性峰和杂质峰在离子色谱阶段分开,那就可以了,即使是穿透峰有活性,但是这不能保证纯度,最好还是再加个分子筛
2楼2013-12-22 21:19:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gogoxiaobai

金虫 (小有名气)


引用回帖:
2楼: Originally posted by hsd3521 at 2013-12-22 01:19:37
一步分离纯化得到纯品的可能性很小,如果楼主的活性峰和杂质峰在离子色谱阶段分开,那就可以了,即使是穿透峰有活性,但是这不能保证纯度,最好还是再加个分子筛

离子交换层析只是我分离纯化的第一步,之后还要走G-25,RP-HPLC。但是穿透峰有活性也没有用啊,梯洗后得到的组分有活性才可以啊
3楼2013-12-22 21:22:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by gogoxiaobai at 2013-12-22 21:22:26
离子交换层析只是我分离纯化的第一步,之后还要走G-25,RP-HPLC。但是穿透峰有活性也没有用啊,梯洗后得到的组分有活性才可以啊...

对于这个问题 我跟楼主理解不一样 如果是想要得到纯品 即使穿透峰有活性 但是吸附峰没有活性 也说明纯化倍率提升了 只是可能因为蛋白特性和填料特性没有很好的结合好 同时不能有效保证纯度 所以还需要进一步纯化 及液相验证等
5楼2013-12-22 21:40:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

李长兵

金虫 (正式写手)



gogoxiaobai(金币+1): 谢谢参与
高深问题
6楼2014-01-16 11:31:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gogoxiaobai(金币+1): 谢谢参与
原来楼主喜欢把样品叫做上样峰,把穿透液叫做穿透峰。就我纯化酶的经验来说,如果通过柱层析法来做,即使穿透液没有酶,酶全都被吸附了,再洗脱下来之后也不能保证没有损失,只是损失的幅度大小不同。
7楼2014-01-25 19:25:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
ohcesc4楼
2013-12-22 21:31   回复  
gogoxiaobai(金币+1): 谢谢参与
1
相关版块跳转 我要订阅楼主 gogoxiaobai 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 26考研一志愿中国石油大学(华东)305分求调剂 +3 嘉年新程 2026-03-15 3/150 2026-03-15 13:58 by 哈哈哈哈嘿嘿嘿
[考研] 一志愿哈工大材料324分求调剂 +5 闫旭东 2026-03-14 5/250 2026-03-14 14:53 by 木瓜膏
[考研] 材料080500调剂求收留 +3 一颗meteor 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:54 by peike
[考研] 一志愿浙江大学0856材料与化工求调剂 +4 yansheng@211 2026-03-09 5/250 2026-03-14 02:10 by JourneyLucky
[考研] 云南财经大学信息学院计算机学硕专硕学位点 +3 zjptai 2026-03-10 5/250 2026-03-14 01:23 by 飞行琦
[考研] 一志愿郑大070303,338分,求调剂 +4 dadawaf 2026-03-10 5/250 2026-03-14 01:20 by lsw010101
[考研] 一志愿安徽大学材料工程专硕313分,求调剂的学校 +8 Yu先生 2026-03-10 10/500 2026-03-14 01:04 by JourneyLucky
[考研] 312求调剂 +6 陌宸希 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:40 by JourneyLucky
[考研] 0856材料与化工309分求调剂 +6 ZyZy…… 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:38 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +6 邱gl 2026-03-12 7/350 2026-03-13 23:24 by 邱gl
[考研] 0703,333分求调剂 一志愿郑州大学-物理化学 +3 李魔女斗篷 2026-03-11 3/150 2026-03-13 22:24 by JourneyLucky
[考研] 材料工程调剂 +9 咪咪空空 2026-03-12 9/450 2026-03-13 22:05 by 星空星月
[考研] [0860]321分求调剂,ab区皆可 +4 宝贵热 2026-03-13 4/200 2026-03-13 22:01 by 星空星月
[考研] 290求调剂 +9 ADT 2026-03-11 9/450 2026-03-13 21:55 by JourneyLucky
[考研] 一志愿211化学学硕310分求调剂 +8 努力奋斗112 2026-03-12 9/450 2026-03-13 15:41 by JourneyLucky
[考研] 289求调剂 +3 李政莹 2026-03-12 3/150 2026-03-13 11:02 by 求调剂zz
[考研] 一志愿华中师范071000,325求调剂 +5 RuitingC 2026-03-12 5/250 2026-03-13 10:43 by hyswxzs
[考研] 0856化工原理 +6 z2839474511 2026-03-10 6/300 2026-03-13 10:41 by houyaoxu
[考研] 333求调剂 +3 152697 2026-03-12 4/200 2026-03-13 07:08 by Iveryant
[考研] 293求调剂,一志愿陕师大生物学 +3 ??????.?.??? 2026-03-09 3/150 2026-03-11 10:02 by 学员8dgXkO
信息提示
请填处理意见