24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1410  |  回复: 6

gogoxiaobai

金虫 (小有名气)


[交流] 有关离子交换层析的问题

我最近在做离子交换层析初步分离纯化多肽,开始用了Q Sepharose Fast Flow分离,但是梯洗得到的肽组分活性最高只有30%,而上样峰的活性差不多达到30%—40%,后来考虑用SP Sepharose Fast Flow分离纯化,但是这个填料更不适合,梯洗后组分的活性基本没有,活性全在上样峰里,我想请教各位高手,我是该用Q Sepharose Fast Flow继续分离纯化?还是不用离子交换层析这一步,直接做下一步G-25凝胶脱盐?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gogoxiaobai(金币+1): 谢谢参与
一步分离纯化得到纯品的可能性很小,如果楼主的活性峰和杂质峰在离子色谱阶段分开,那就可以了,即使是穿透峰有活性,但是这不能保证纯度,最好还是再加个分子筛
2楼2013-12-22 21:19:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gogoxiaobai

金虫 (小有名气)


引用回帖:
2楼: Originally posted by hsd3521 at 2013-12-22 01:19:37
一步分离纯化得到纯品的可能性很小,如果楼主的活性峰和杂质峰在离子色谱阶段分开,那就可以了,即使是穿透峰有活性,但是这不能保证纯度,最好还是再加个分子筛

离子交换层析只是我分离纯化的第一步,之后还要走G-25,RP-HPLC。但是穿透峰有活性也没有用啊,梯洗后得到的组分有活性才可以啊
3楼2013-12-22 21:22:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by gogoxiaobai at 2013-12-22 21:22:26
离子交换层析只是我分离纯化的第一步,之后还要走G-25,RP-HPLC。但是穿透峰有活性也没有用啊,梯洗后得到的组分有活性才可以啊...

对于这个问题 我跟楼主理解不一样 如果是想要得到纯品 即使穿透峰有活性 但是吸附峰没有活性 也说明纯化倍率提升了 只是可能因为蛋白特性和填料特性没有很好的结合好 同时不能有效保证纯度 所以还需要进一步纯化 及液相验证等
5楼2013-12-22 21:40:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

李长兵

金虫 (正式写手)



gogoxiaobai(金币+1): 谢谢参与
高深问题
6楼2014-01-16 11:31:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gogoxiaobai(金币+1): 谢谢参与
原来楼主喜欢把样品叫做上样峰,把穿透液叫做穿透峰。就我纯化酶的经验来说,如果通过柱层析法来做,即使穿透液没有酶,酶全都被吸附了,再洗脱下来之后也不能保证没有损失,只是损失的幅度大小不同。
7楼2014-01-25 19:25:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
ohcesc4楼
2013-12-22 21:31   回复  
gogoxiaobai(金币+1): 谢谢参与
1
相关版块跳转 我要订阅楼主 gogoxiaobai 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[有机交流] 3-溴吡啶-4-甲醛合成 10+3 雪糕也能爆炸 2026-03-31 9/450 2026-04-06 00:24 by nBu锂
[考研] 求助071001调剂!!! +3 黄守松 2026-04-05 4/200 2026-04-05 21:01 by barlinike
[考研] 一志愿211生物学280分 求调剂 +4 李rien 2026-04-05 4/200 2026-04-05 18:01 by kk112233
[考研] 电子信息调剂交叉学科有推荐吗 +6 jhtfeybgj 2026-04-01 9/450 2026-04-05 11:13 by 猪会飞
[考研] 316求调剂 +9 墨辰_Orion926 2026-04-04 9/450 2026-04-04 21:35 by lbsjt
[考研] 一志愿华南师范361分,化学求调剂 +7 Nicole88888 2026-04-01 7/350 2026-04-04 18:28 by macy2011
[考研] 22408求调剂 354分 可跨专业 +3 hannnnnnn 2026-04-04 3/150 2026-04-04 14:35 by 土木硕士招生
[考研] 22408,264求调剂 +3 ywh729 2026-04-03 4/200 2026-04-04 11:04 by ywh729
[考研] 070300一志愿211,312分求调剂院校 +16 小黄鸭宝 2026-03-30 16/800 2026-04-03 19:53 by lijunpoly
[硕博家园] 求老师收留 +9 lllq123 2026-04-03 9/450 2026-04-03 13:48 by 呼吸都是减肥
[考研] 求材料调剂 一志愿南昌大学 328分 +5 yyy..... 2026-04-03 5/250 2026-04-03 13:46 by 百灵童888
[考研] 071000生物学调剂 +8 知昭蔓 2026-04-02 8/400 2026-04-03 10:36 by macy2011
[考研] 生物学求调剂 +3 15064154688 2026-04-03 3/150 2026-04-03 10:28 by macy2011
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +6 崔wj 2026-04-02 6/300 2026-04-03 10:19 by 蓝云思雨
[考研] 318求调剂 +3 笃行致远. 2026-03-31 4/200 2026-04-02 15:56 by Jaylen.
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358 +3 cs0106 2026-04-02 5/250 2026-04-02 11:37 by olim
[考研] 生物学327,求调剂 +5 书上的梅子 2026-04-01 6/300 2026-04-02 06:47 by ilovexiaobin
[考研] 379求调剂 +3 ?苦瓜不苦 2026-04-01 3/150 2026-04-01 20:09 by 暮云清寒
[考研] 286求调剂 +5 Sa67890. 2026-04-01 7/350 2026-04-01 19:50 by 6781022
[考研] 370求调剂 +3 080700调剂 2026-03-30 3/150 2026-03-31 01:09 by A_Zhe
信息提示
请填处理意见