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dandan_cece

铜虫 (正式写手)

[求助] 关于离子交换层析 梯度洗脱的问题

我用SP Sephadex C-25填料,4*40cm柱子纯化大米多肽,多肽分子量范围小于1kDa,醋酸钠-醋酸缓冲液(pH 4),NaCl(0~1M)梯度洗脱,部分收集器收集组分,每管测出最大吸收值只有0.1多,今天用2M的NaCl洗柱子,测出吸收值0.4多,这是不是代表之前梯度洗脱的时候多肽没出来?

请各位牛人指教啊啊啊
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hsd3521

主管区长 (知名作家)

火星驻地球联络处主任科员

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
dandan_cece: 金币+10, 有帮助, 谢啦 2013-04-07 12:48:29
坚持下样品蛋白浓度和活性
太胖了!~
2楼2013-04-02 18:08:01
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dandan_cece

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hsd3521 at 2013-04-02 18:08:01
坚持下样品蛋白浓度和活性

我是多肽诶,如果要看浓度,是不是要做电泳哇?活性是有的,我测过了。
3楼2013-04-03 15:53:31
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hsd3521

主管区长 (知名作家)

火星驻地球联络处主任科员

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【答案】应助回帖

收集的峰段的活性测定 即可表明 洗脱是否成功
吸收值低 说明样品浓度低 或者你的吸收波长错了?
太胖了!~
4楼2013-04-03 17:36:47
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dandan_cece

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by hsd3521 at 2013-04-03 17:36:47
收集的峰段的活性测定 即可表明 洗脱是否成功
吸收值低 说明样品浓度低 或者你的吸收波长错了?

波长应该没错,看了几篇文献都是在220nm测,可能还是样品浓度太低了,第一次做这个,真心没经验,好多不懂
5楼2013-04-07 12:47:55
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