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tyjackie

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】流动相梯度洗脱问题 已有8人参与

按照药典要求,采用甲醇-磷酸盐两相梯度洗脱时,由于仪器比例阀的问题,出峰时间相差很大,对照品峰面积波动也超过了10%
想请教下,有没有朋友遇到过这样的问题,是不是梯度变化的不稳定,也会导致峰面积的变化。
P:以前只知道流速不同,峰面积会有较大变化
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wang861216

铜虫 (初入文坛)


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梯度变化不稳定   能不能检测到实际的梯度?如果变化较大  应该能影响峰面积
2楼2010-08-30 10:46:29
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diannao001

铁杆木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你怎么知道是比例阀的问题?如果是它问题的话,你的仪器需要进行校正了。另外检查一下进样器是不是也有误差?梯度洗脱应该不会对峰面积影响很大的,我一直都用梯度做方法学实验。
3楼2010-08-30 10:51:04
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tyjackie

木虫 (正式写手)

应该是比例阀的问题,但是现在想确认的是,在流速不变的情况下,梯度洗脱时候,两相比例波动较大,是否会导致峰面积的波动?
4楼2010-08-30 10:54:18
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lemonin2008

铁杆木虫 (正式写手)


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会不会恢复初始梯度后平衡时间不够
5楼2010-08-30 11:10:40
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tyjackie

木虫 (正式写手)

不会,回复初始梯度平衡时间15min,前期研究表明足够 了
一般5-6min就平衡了
6楼2010-08-30 11:24:32
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lemonin2008

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by tyjackie at 2010-08-30 10:26:35:
按照药典要求,采用甲醇-磷酸盐两相梯度洗脱时,由于仪器比例阀的问题,出峰时间相差很大,对照品峰面积波动也超过了10%
想请教下,有没有朋友遇到过这样的问题,是不是梯度变化的不稳定,也会导致峰面积的变化。 ...

去年有一次吧,在一周内做实验都很怪异,做梯度走样品时保留时间变动幅度很大,峰面积有没有变化记不得了,但后来再作就又没事了
我觉得如果你之前用这台仪器都很好的话,仪器应该没有问题的
7楼2010-08-30 11:50:02
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tyjackie

木虫 (正式写手)

下午换台机子做做看
8楼2010-08-30 12:07:19
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ljh616528

金虫 (正式写手)


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你是手动还是自动进样?如果是手动的话,会不会进样阀里有残留?
温度也会导致保留时间变化
平安是福
9楼2010-08-30 12:18:12
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mayanstude

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
差个两三分钟很正常的。本人最近也在做梯度。流动相是磷酸缓冲盐和乙腈。走梯度有几个不好,1.基线不稳定,2.重现性不好。3.带来一些鬼峰。这些事可以说的过去的
不忘初心,方的始终
10楼2010-09-03 17:11:28
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