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piaoxue1988木虫 (小有名气)
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高效液相梯度洗脱问题
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我目前要用岛津LC-10ATVP的高效液相分析一多肽化合物,流动相:乙腈-水,检测波长220nm。但摸条件过程中出现了以下问题: (1)等度洗脱时样品峰宽的不行,峰宽达到2min。 (2)梯度洗脱时基线漂移严重,而且进空样也会出现杂峰(柱子是新的,只做我我的样品,而且我的样品是上过制备HPLC的,比较纯)。 由于我是第一次用岛津LC-10ATVP高效液相作分析,所以不知道对一个新的化合物如何摸条件才能使它的峰型好一些,基线平一些,梯度应该怎么设置呢?希望大家能够指点指点,再此谢了!!! |
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【答案】应助回帖
★ ★ ★
jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2011-11-29 20:05:53
piaoxue1988(金币+3): 2011-11-29 20:22:46
piaoxue1988: 金币+2 2012-04-13 21:44:53
jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2011-11-29 20:05:53
piaoxue1988(金币+3): 2011-11-29 20:22:46
piaoxue1988: 金币+2 2012-04-13 21:44:53
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提一点小建议,梯度洗脱是容易出现杂峰,如果等度洗脱只是峰宽的问题,为什么不试一试在次基础上优化一下条件呢,譬如流动相的配比是否合适,流速,或者流动相的pH值,我没有分离过多肽化合物,流动相只能用乙腈和水吗?我不太清楚,可不可以换用浓度小的盐呢! 还有我也走过梯度洗脱,如果梯度合适的话也可以没有杂峰的,不过这得大胆的去尝试喽,虽然条件不太好摸,但是选好了梯度,峰型是不错的! |
2楼2011-11-29 19:37:05
piaoxue1988
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