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piaoxue1988木虫 (小有名气)
金虫
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[求助]
高效液相梯度洗脱问题
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我目前要用岛津LC-10ATVP的高效液相分析一多肽化合物，流动相：乙腈-水，检测波长220nm。但摸条件过程中出现了以下问题： （1）等度洗脱时样品峰宽的不行，峰宽达到2min。 （2）梯度洗脱时基线漂移严重，而且进空样也会出现杂峰（柱子是新的，只做我我的样品，而且我的样品是上过制备HPLC的，比较纯）。 由于我是第一次用岛津LC-10ATVP高效液相作分析，所以不知道对一个新的化合物如何摸条件才能使它的峰型好一些，基线平一些，梯度应该怎么设置呢？希望大家能够指点指点，再此谢了！！！ |
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jinemoon
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8楼2012-06-11 15:12:02
【答案】应助回帖
★ ★ ★
jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2011-11-29 20:05:53
piaoxue1988(金币+3): 2011-11-29 20:22:46
piaoxue1988: 金币+2 2012-04-13 21:44:53
jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2011-11-29 20:05:53
piaoxue1988(金币+3): 2011-11-29 20:22:46
piaoxue1988: 金币+2 2012-04-13 21:44:53
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提一点小建议，梯度洗脱是容易出现杂峰，如果等度洗脱只是峰宽的问题，为什么不试一试在次基础上优化一下条件呢，譬如流动相的配比是否合适，流速，或者流动相的pH值，我没有分离过多肽化合物，流动相只能用乙腈和水吗？我不太清楚，可不可以换用浓度小的盐呢！ 还有我也走过梯度洗脱，如果梯度合适的话也可以没有杂峰的，不过这得大胆的去尝试喽，虽然条件不太好摸，但是选好了梯度，峰型是不错的！ |
2楼2011-11-29 19:37:05
piaoxue1988
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