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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物化学 » 【求助】液相样品测定 梯度洗脱相关问题？？
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yangxicshe

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助】液相样品测定 梯度洗脱相关问题？？ 已有4人参与

HPLC做梯度条件不满足，取其一个梯度坐等度洗脱可不可以？

    各位老师好，我们单位的EISD-HPLC只有一个输液泵（岛津LC-10AD），没有办法满足梯度洗脱的条件。我发现资料上我要测的人参皂苷大约在20分钟出峰，而资料上梯度洗脱的时间却有55分钟之久，我能不能取20分钟时所在梯度的流动相比例做等度洗脱呢？
    另外，岛津LC-10AD泵的压力单位是psi吗？
    新手上路，求各位老师多关照啊！
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1楼 2011-03-19 14:15:28
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cpuyxj

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+1): 谢谢！ 2011-03-21 16:29:10
谁不想时间短一点啊，人家走55分钟肯定是有原因的啦，后面肯定还有东西没出来，而且梯度还要再平衡回到初始比例呀。你不能用那个比例走等度的。如果要走的话，你等出峰以后，停下来，换上有机相把没冲出来的东西再快速冲出来，再换回你的流动相平衡，平衡好进下一针。
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再想哭，也要微笑着说一句：你大爷的。
2楼2011-03-19 16:13:16
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heyugudu

银虫 (正式写手)
如果是单一的一个人身皂苷是可以的，我们也用岛津等度洗脱过。
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放眼看天空的颜色…
3楼2011-03-20 19:46:19
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yangxicshe

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by cpuyxj at 2011-03-19 16:13:16:
谁不想时间短一点啊，人家走55分钟肯定是有原因的啦，后面肯定还有东西没出来，而且梯度还要再平衡回到初始比例呀。你不能用那个比例走等度的。如果要走的话，你等出峰以后，停下来，换上有机相把没冲出来的东西再 ...

岛津LC-10AD上怎么调压力单位啊?我发现那几个键不能调啊！

我走等度可以走50分钟左右，这样后面东西应该可以出来了吧？
后来我查资料这样做是有点不太合适，那我的流动相乙腈与水的比例定多少为好呢?
以下是资料上的梯度条件：
时间     乙腈（%）      水（%）        流速（ml/min）
0-23                 20                        80                                 1
23-45              20                         80                                 1
45-47              47                         53                                1
47-55            100                         0                                  1
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4楼2011-03-21 14:20:07
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cpuyxj

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by yangxicshe at 2011-03-21 14:20:07:
岛津LC-10AD上怎么调压力单位啊?我发现那几个键不能调啊！

我走等度可以走50分钟左右，这样后面东西应该可以出来了吧？
后来我查资料这样做是有点不太合适，那我的流动相乙腈与水的比例定多少为好呢?
以 ...

你先确定你的样品纯不纯，如果你的人参皂苷是纯品的话，那你用20-80 出峰就当然可以啦！可是提取出来的浸膏或是什么肯定不很纯，有些小极性的会在很后出峰，就算你等度跑50分钟也出不来，因为你的有机相只有20%，洗脱强度不够，你看文献里的是逐渐变成纯有机相的。
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再想哭，也要微笑着说一句：你大爷的。
5楼2011-03-22 08:52:33
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yugijiang

木虫 (著名写手)
你这个方法可以用等度把你要的峰出来后再用有机相高的溶液来洗脱强保留的就ok了
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6楼2012-06-07 19:40:17
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