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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物化学 » 【求助】液相样品测定 梯度洗脱相关问题？？
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yangxicshe

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助】液相样品测定 梯度洗脱相关问题？？ 已有4人参与

HPLC做梯度条件不满足，取其一个梯度坐等度洗脱可不可以？

    各位老师好，我们单位的EISD-HPLC只有一个输液泵（岛津LC-10AD），没有办法满足梯度洗脱的条件。我发现资料上我要测的人参皂苷大约在20分钟出峰，而资料上梯度洗脱的时间却有55分钟之久，我能不能取20分钟时所在梯度的流动相比例做等度洗脱呢？
    另外，岛津LC-10AD泵的压力单位是psi吗？
    新手上路，求各位老师多关照啊！
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1楼 2011-03-19 14:15:28
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heyugudu

银虫 (正式写手)
如果是单一的一个人身皂苷是可以的，我们也用岛津等度洗脱过。
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放眼看天空的颜色…
3楼2011-03-20 19:46:19
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cpuyxj

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+1): 谢谢！ 2011-03-21 16:29:10
谁不想时间短一点啊，人家走55分钟肯定是有原因的啦，后面肯定还有东西没出来，而且梯度还要再平衡回到初始比例呀。你不能用那个比例走等度的。如果要走的话，你等出峰以后，停下来，换上有机相把没冲出来的东西再快速冲出来，再换回你的流动相平衡，平衡好进下一针。
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再想哭，也要微笑着说一句：你大爷的。
2楼2011-03-19 16:13:16
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yangxicshe

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by cpuyxj at 2011-03-19 16:13:16:
谁不想时间短一点啊，人家走55分钟肯定是有原因的啦，后面肯定还有东西没出来，而且梯度还要再平衡回到初始比例呀。你不能用那个比例走等度的。如果要走的话，你等出峰以后，停下来，换上有机相把没冲出来的东西再 ...

岛津LC-10AD上怎么调压力单位啊?我发现那几个键不能调啊！

我走等度可以走50分钟左右，这样后面东西应该可以出来了吧？
后来我查资料这样做是有点不太合适，那我的流动相乙腈与水的比例定多少为好呢?
以下是资料上的梯度条件：
时间     乙腈（%）      水（%）        流速（ml/min）
0-23                 20                        80                                 1
23-45              20                         80                                 1
45-47              47                         53                                1
47-55            100                         0                                  1
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4楼2011-03-21 14:20:07
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cpuyxj

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by yangxicshe at 2011-03-21 14:20:07:
岛津LC-10AD上怎么调压力单位啊?我发现那几个键不能调啊！

我走等度可以走50分钟左右，这样后面东西应该可以出来了吧？
后来我查资料这样做是有点不太合适，那我的流动相乙腈与水的比例定多少为好呢?
以 ...

你先确定你的样品纯不纯，如果你的人参皂苷是纯品的话，那你用20-80 出峰就当然可以啦！可是提取出来的浸膏或是什么肯定不很纯，有些小极性的会在很后出峰，就算你等度跑50分钟也出不来，因为你的有机相只有20%，洗脱强度不够，你看文献里的是逐渐变成纯有机相的。
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再想哭，也要微笑着说一句：你大爷的。
5楼2011-03-22 08:52:33
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