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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】求助：液相色谱的流动相梯度设置问题！！！
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jlxf

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助】求助：液相色谱的流动相梯度设置问题！！！

请教高手高效液相的梯度设置问题！
本人不太会用设置梯度洗脱，恳请有经验的高手指点一下。
最好是有实战的例子！！！
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1楼2010-11-11 11:52:25
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lrh1983

木虫 (正式写手)
jlxf(金币+2): 2010-11-11 15:09:10
用的哪个厂家的仪器？
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2楼2010-11-11 11:58:09
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jlxf

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by lrh1983 at 2010-11-11 11:58:09:
用的哪个厂家的仪器？

是Waters 的UPLC（H-CLASS）
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3楼2010-11-11 15:08:36
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Renr

铁杆木虫 (知名作家)
★
jlxf(金币+1): 2010-11-11 17:09:45
pplover(金币+1):谢谢分享自己的经验... 2010-11-11 21:04:42
我用过岛津的和Aglient的
设置很省事的
有个添加时间和比例的
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4楼2010-11-11 15:20:47
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Renr

铁杆木虫 (知名作家)
jlxf(金币+1): 2010-11-11 17:09:41
用过含盐的流动相  B 为甲醇
  time（min）   B%
  0                   10
  30                 10
   31                 50
   60                 50
   91                 100
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5楼2010-11-11 15:29:10
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lrh1983

木虫 (正式写手)
jlxf(金币+4): 2010-11-11 17:09:34
有陡变和渐变两种梯度
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6楼2010-11-11 16:49:42
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JOAN19850425

银虫 (小有名气)
跟普通的液相一样的 只是要把流速 比例转换下 从有机相所占的比例小到大设就行了
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7楼2010-11-11 19:29:12
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ABCzero

至尊木虫 (正式写手)
您老真会开玩笑，人家用的是uplc
一般三五分钟就搞定了，你这梯度也忒夸张了吧
引用回帖:
Originally posted by Renr at 2010-11-11 15:29:10:
用过含盐的流动相  B 为甲醇
  time（min）   B%
  0                   10
  30                 10
   31                 50
   60                 50
   91                 100

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8楼2010-11-11 19:47:21
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ABCzero

至尊木虫 (正式写手)
★
pplover(金币+1):谢谢分享自己的评论... 2010-11-11 21:05:43
这玩意很好使，5分钟内有机相10%到90%，看分离情况，适当修改时间和曲线类型，一般ok
引用回帖:
Originally posted by jlxf at 2010-11-11 15:08:36:

是Waters 的UPLC（H-CLASS）

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9楼2010-11-11 19:50:40
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Renr

铁杆木虫 (知名作家)
ABC
你没有用过HPLC Aglient的吗？
用过含有缓冲盐的流动相就是这么冲洗的
先冲半小时的水相90%
在50%的有机相
最后纯有机相冲
要不就是你们太阔气了，柱子用用就废掉了
下回请尊重别人的意见
可以不采纳不可以抨击
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10楼2010-11-12 10:43:35
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ABCzero

至尊木虫 (正式写手)
别动怒啊，如果觉得我冒犯了您，这边给您道歉
lz应该是问梯度洗脱，不是冲柱子吧

另外，楼主用的是waters UPLC，流动相一般只建议添加挥发性有机酸或者铵盐，柱子冲洗也没有这么复杂，这个跟aglient有很大的区别

再次向您表示歉意，不好意思
引用回帖:
Originally posted by Renr at 2010-11-12 10:43:35:
ABC
你没有用过HPLC Aglient的吗？
用过含有缓冲盐的流动相就是这么冲洗的
先冲半小时的水相90%
在50%的有机相
最后纯有机相冲
要不就是你们太阔气了，柱子用用就废掉了
下回请尊重别人的意见
可以不采纳 ...

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11楼2010-11-14 09:40:01
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2010116136

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2052434楼: Originally posted by ABCzero at 2010-11-14 09:40:01
别动怒啊，如果觉得我冒犯了您，这边给您道歉
lz应该是问梯度洗脱，不是冲柱子吧

另外，楼主用的是waters UPLC，流动相一般只建议添加挥发性有机酸或者铵盐，柱子冲洗也没有这么复杂，这个跟aglient有很大的区别 ...

应对很得体，表述很清晰。我在用Aglient的UPLC，柱子冲洗确实就是几分钟的事情。一小时一百块钱，要照着九十分钟冲柱子，老板会把我冲了。ABC看样子挺专业的啊，我刚开始接触UPLC，想请教一下，我流动相里都添加了少量乙酸，加酸的流动相好像是现用现配比较好，具体为什么，我不清楚，还有加乙酸的目的是什么，有时间的话还麻烦给解释下。算是普及下科普吧，谢谢
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12楼2012-12-16 20:24:09
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ABCzero

至尊木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2415670楼: Originally posted by 2010116136 at 2012-12-16 20:24:09
应对很得体，表述很清晰。我在用Aglient的UPLC，柱子冲洗确实就是几分钟的事情。一小时一百块钱，要照着九十分钟冲柱子，老板会把我冲了。ABC看样子挺专业的啊，我刚开始接触UPLC，想请教一下，我流动相里都添加了 ...

流动相都是现配的好啊，有机酸还会挥发，营养盐的话还容易长菌，等等。乙酸主要是调ph，改善峰型和改善化合物在色谱柱上的保留
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13楼2012-12-20 21:56:37
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