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怎样理解梯度洗脱,该怎么设置梯度
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hu-hui-min
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怎样理解梯度洗脱,该怎么设置梯度
已有2人参与
梯度洗脱该怎么设置,比如:时间 速率 ml/min A乙腈 B水
0 1 20 80
3 1 20 80
5 1 5 95
5.5 1 5 95
7 1 0 100
7.5 1 20 80
10 1 20 80
3~5min表示正在梯度洗脱?梯度逐渐改变?等度洗脱怎么设置?(我用的是岛津 反向色谱) 上面设置的梯度对吗?
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严谨求学
1楼
2015-01-05 12:36:32
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是C18色谱柱吗?能否提供具体的型号。之所以这么问是因为你的梯度水的比例越来越高不太符合一般反相色谱的惯例。
等度洗脱你就设置起始和结束时间,比例设为相同就行了。比如:
时间 流速 ml/min A乙腈 B水
0 1.0 20 80
10 1.0 20 80
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雲幕低垂映桂子,江月留白問柳心。
2楼
2015-01-05 13:15:51
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2015-01-05 17:22:10
楼主的设置不对。
把第三四行的乙腈都改成95,第五行乙腈改为100.
梯度是指逐渐提高乙腈的比例。
个人觉得楼主的整个梯度都不大合理。
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3楼
2015-01-05 13:16:25
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hu-hui-min
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3楼
:
Originally posted by
cpuclz
at 2015-01-05 13:16:25
楼主的设置不对。
把第三四行的乙腈都改成95,第五行乙腈改为100.
梯度是指逐渐提高乙腈的比例。
个人觉得楼主的整个梯度都不大合理。
......我写反了,本来是想要那样写的。那就是说3~5min正在梯度洗脱,5~5.5是维持这个梯度一段时间,是吗?最后再把梯度设定回去?
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严谨求学
4楼
2015-01-05 14:32:40
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【答案】应助回帖
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梯度洗脱是在流动相设定极性配比市,不同柱分离时间内洗脱液极性有差异,等度洗脱则是保持该特定极性维持一段时间,核心目的是为了使目标物分离的更好。至于等度洗脱和梯度洗脱极性的选择可参考点板结果或者已知目标组分的极性状况,根据相似相容原理。
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人生能有几回搏?此时不搏待何夕?
5楼
2015-01-05 16:02:17
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4楼
:
Originally posted by
hu-hui-min
at 2015-01-05 14:32:40
......我写反了,本来是想要那样写的。那就是说3~5min正在梯度洗脱,5~5.5是维持这个梯度一段时间,是吗?最后再把梯度设定回去?...
对!
3-5min是真正的梯度。5-7min都在冲柱子
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6楼
2015-01-05 16:35:01
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梯度洗脱就是根据各组分在色谱柱内吸附能力的不同,通过改变流动相中的有机相的组分,在保证分离度的情况下,使各组分在合适的时间内分离!
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7楼
2015-01-06 14:06:00
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