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HPLC梯度洗脱分离度不好,麻烦给点建议啊
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651493221
银虫
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HPLC梯度洗脱分离度不好,麻烦给点建议啊
用C18柱,流动相0.04%甲酸-90%乙腈,采用梯度洗脱,程序为:
90%乙腈 0-15min,28-38%, 15-40min,38-38,40-45min,38-28。
色谱图如下:
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1楼
2012-05-04 11:59:40
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jiangchunyong: 金币+1, 谢谢
2012-05-04 13:51:49
你是想分开第二个图的主峰与后面的峰?分离度有多少啊?可以把梯度再升慢一点试试。
两个图不是一个样品进的吧?第二个图是你破坏的样品?主峰都破坏没了?是不是破坏力度太大了,建议调到合适的破坏程度后再来调整方法。
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2楼
2012-05-04 13:19:23
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感谢参与,应助指数 +1
10-20分走一个梯度,时间长一些可能会有改善
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3楼
2012-05-04 13:51:13
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zigang
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【答案】应助回帖
好像没表达清楚,我的意思是在38%(出峰时的比例)左右走一个小一点的梯度,时间拉长一些,希望会有帮助。
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4楼
2012-05-04 13:57:06
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651493221
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2楼
:
Originally posted by
wddmq
at 2012-05-04 13:19:23:
你是想分开第二个图的主峰与后面的峰?分离度有多少啊?可以把梯度再升慢一点试试。
两个图不是一个样品进的吧?第二个图是你破坏的样品?主峰都破坏没了?是不是破坏力度太大了,建议调到合适的破坏程度后再来调 ...
第一个图是对照品,第二个是样品,进的是中药,成分比较复杂,并且含量太低,与旁边的大峰分离不开
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5楼
2012-05-04 14:46:26
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4楼
:
Originally posted by
zigang
at 2012-05-04 13:57:06:
好像没表达清楚,我的意思是在38%(出峰时的比例)左右走一个小一点的梯度,时间拉长一些,希望会有帮助。
可不可以这样子改:0-10min,28-33; 10-20,33-38; 20-40,38-38; 40-45,38-28 我只是需要16min后面的那个小峰,用外标法做含量测定,只要这个峰的分离度好,是不是其他峰可以不管了呢
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6楼
2012-05-04 15:07:35
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痴夷子皮
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起始比例28%可以调高一点,比如32%~38%,或时间稍微延长2min;15-40min,时间可以缩短一点,到35min。
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守候在风中的宁静。
7楼
2012-05-04 15:36:45
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xinyue2011
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我这里的事安捷伦1260 可以再调整一下梯度吧 尽可能找到最有影响的梯度
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8楼
2012-05-05 18:36:09
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将你主峰那一部分的浓度比细分一下,先梯度,再等度,然后再梯度,这样试试看呢?
比如:28-35% 10min,35-37%10min,37-37%20min,37-40%10min 。。。 have a try~
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太豪爽、太豪放、第一杯都把酒端上!大火炕、摸着烫、像咱性格一个样!热心肠、爱帮忙、有话不往肚里藏!叫声老铁别慌今后啥事咱都一起抗!
9楼
2012-12-20 14:38:22
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