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651493221

银虫 (初入文坛)

[求助] HPLC梯度洗脱分离度不好，麻烦给点建议啊

用C18柱，流动相0.04%甲酸-90%乙腈，采用梯度洗脱，程序为：
90%乙腈  0-15min,28-38%,    15-40min，38-38，40-45min，38-28。
色谱图如下:
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1楼 2012-05-04 11:59:40
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651493221

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by zigang at 2012-05-04 13:57:06:
好像没表达清楚，我的意思是在38%（出峰时的比例）左右走一个小一点的梯度，时间拉长一些，希望会有帮助。

可不可以这样子改：0-10min,28-33;   10-20,33-38;   20-40,38-38;  40-45,38-28  我只是需要16min后面的那个小峰，用外标法做含量测定，只要这个峰的分离度好，是不是其他峰可以不管了呢
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6楼2012-05-04 15:07:35
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wddmq

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
jiangchunyong: 金币+1, 谢谢 2012-05-04 13:51:49
你是想分开第二个图的主峰与后面的峰？分离度有多少啊？可以把梯度再升慢一点试试。
两个图不是一个样品进的吧？第二个图是你破坏的样品？主峰都破坏没了？是不是破坏力度太大了，建议调到合适的破坏程度后再来调整方法。
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1234
2楼2012-05-04 13:19:23
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zigang

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
10-20分走一个梯度，时间长一些可能会有改善
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3楼2012-05-04 13:51:13
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zigang

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

好像没表达清楚，我的意思是在38%（出峰时的比例）左右走一个小一点的梯度，时间拉长一些，希望会有帮助。
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4楼2012-05-04 13:57:06
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