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651493221

银虫 (初入文坛)

[求助] HPLC梯度洗脱分离度不好,麻烦给点建议啊

用C18柱,流动相0.04%甲酸-90%乙腈,采用梯度洗脱,程序为:
90%乙腈  0-15min,28-38%,    15-40min,38-38,40-45min,38-28。
色谱图如下:



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651493221

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by zigang at 2012-05-04 13:57:06:
好像没表达清楚,我的意思是在38%(出峰时的比例)左右走一个小一点的梯度,时间拉长一些,希望会有帮助。

可不可以这样子改:0-10min,28-33;   10-20,33-38;   20-40,38-38;  40-45,38-28  我只是需要16min后面的那个小峰,用外标法做含量测定,只要这个峰的分离度好,是不是其他峰可以不管了呢
6楼2012-05-04 15:07:35
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查看全部 9 个回答

wddmq

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
jiangchunyong: 金币+1, 谢谢 2012-05-04 13:51:49
你是想分开第二个图的主峰与后面的峰?分离度有多少啊?可以把梯度再升慢一点试试。
两个图不是一个样品进的吧?第二个图是你破坏的样品?主峰都破坏没了?是不是破坏力度太大了,建议调到合适的破坏程度后再来调整方法。
1234
2楼2012-05-04 13:19:23
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zigang

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
10-20分走一个梯度,时间长一些可能会有改善
3楼2012-05-04 13:51:13
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zigang

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

好像没表达清楚,我的意思是在38%(出峰时的比例)左右走一个小一点的梯度,时间拉长一些,希望会有帮助。
4楼2012-05-04 13:57:06
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