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651493221

银虫 (初入文坛)

[求助] HPLC梯度洗脱分离度不好,麻烦给点建议啊

用C18柱,流动相0.04%甲酸-90%乙腈,采用梯度洗脱,程序为:
90%乙腈  0-15min,28-38%,    15-40min,38-38,40-45min,38-28。
色谱图如下:



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zigang

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
10-20分走一个梯度,时间长一些可能会有改善
3楼2012-05-04 13:51:13
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查看全部 9 个回答

wddmq

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
jiangchunyong: 金币+1, 谢谢 2012-05-04 13:51:49
你是想分开第二个图的主峰与后面的峰?分离度有多少啊?可以把梯度再升慢一点试试。
两个图不是一个样品进的吧?第二个图是你破坏的样品?主峰都破坏没了?是不是破坏力度太大了,建议调到合适的破坏程度后再来调整方法。
1234
2楼2012-05-04 13:19:23
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zigang

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

好像没表达清楚,我的意思是在38%(出峰时的比例)左右走一个小一点的梯度,时间拉长一些,希望会有帮助。
4楼2012-05-04 13:57:06
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651493221

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wddmq at 2012-05-04 13:19:23:
你是想分开第二个图的主峰与后面的峰?分离度有多少啊?可以把梯度再升慢一点试试。
两个图不是一个样品进的吧?第二个图是你破坏的样品?主峰都破坏没了?是不是破坏力度太大了,建议调到合适的破坏程度后再来调 ...

第一个图是对照品,第二个是样品,进的是中药,成分比较复杂,并且含量太低,与旁边的大峰分离不开
5楼2012-05-04 14:46:26
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