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【求助】请教:液相色谱梯度设计的问题
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langchentf
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【求助】请教:液相色谱梯度设计的问题
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分析脂肪酸,如何确定液相色谱分析的梯度,从何入手,流动相怎么选择呢,还有梯度的时间变化根据什么确定呢
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2010-04-15 16:02:42
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opq691(金币+1):感谢参与交流,欢迎常来分析版讨论应助 2010-04-16 15:01
甲醇和水就行吧,关键是要控制好PH值,防止脂肪酸离解。梯度的时间变化根据什么确定还要等待高手解答。
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2010-04-15 16:57:29
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happy169(金币+2):^_^ 2010-04-16 14:30
就用通常方法就行,先100%乙腈跑30-40分钟。看出峰情况,如果全部在10分以内出完,就用小比例乙腈大比例水相逐渐变了大比例乙腈和小比例水就行,确保所有的峰出来就行,再看分离,逐渐调整。如果10分以后还出峰,那就要换柱子,确保所有峰在10分之内出完才行。
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2010-04-15 20:09:24
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opq691(金币+1):感谢参与交流,欢迎常来分析版讨论应助 2010-04-16 15:01
以磷酸二氢铵为流动相
可先同用标准有机酸比较颜色,看样品比较接近哪一个,再选其附近的作为标准,绘制标准曲线,从而求出样品的值
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尘埃落定之前,一切皆有可能
4楼
2010-04-15 20:38:45
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opq691(金币+2):感谢参与交流,欢迎常来分析版讨论应助 2010-04-17 19:25
不要一开始就想着用梯度吧,先等度摸摸样品情况,找到大概极性范围,注意调整pH值。至于梯度要看你样品需要不需要,要是等度满足不了的情况下再去考虑梯度吧,梯度可以根据等度出来的图具体情况定极性范围和调整时间。
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2010-04-17 17:01:51
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非常感谢,等度分不开,所以考虑梯度,那么如何根据等度的图进行梯度设计呢,几个物质极性差不多,等度是在分不开
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6楼
2010-04-26 13:02:17
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happy169(金币+2):^_^ 2010-04-27 11:06
梯度的最基本原理是:先用洗脱能力小的流动相(就是有机相比例低),保证难保留的样品先出峰后,再加大有机相比例洗脱容易保留的组分。至于具体比例是多少,慢慢摸索吧,这个不难的。
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7楼
2010-04-26 19:17:42
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