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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】求教如何调整HPLC梯度
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xiaoda1984

铁杆木虫 (著名写手)

小蛀虫

[交流] 【求助】求教如何调整HPLC梯度已有8人参与

本人使用氨基柱，紫外检测器，梯度见下：

time    流速 水   乙腈
0       0.8      0       100%
30     0.8      50%   50%  

结果见图,第一个峰保留时间为21min
请问如何调整梯度，使所有峰保留时间缩短，并且峰分的更开？


[ Last edited by xiaoda1984 on 2010-5-3 at 19:32 ]
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寄蜉蝣于天地，渺沧海之一粟、哀吾生之须臾，羡长江之无穷。
1楼2010-05-03 19:30:25
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jsys

荣誉版主 (著名写手)

博洋Lab
xiaoda1984(金币+5):非常感谢哈，明天试试，希望能继续提供帮忙啊 2010-05-04 20:59:09
time    流速 水   乙腈
0       1.5     60%     40%
15     1.5     10%   90%
25     1.5     10%   90%
27     1.5     60%     40%
35     1.5     60%     40%
先试再说！

[ Last edited by jsys on 2010-5-4 at 09:00 ]
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6楼2010-05-04 08:55:10
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普通回帖

wlfine82

木虫 (正式写手)
★
铁甲骑兵(金币+1):欢迎常来小木虫。 2010-05-03 20:57
xiaoda1984(金币+1):ths，那如何使后面的峰分的更开一些呢，如何调整梯度 2010-05-04 07:38
第一个峰出来的时间太长了，可以加大流速
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2楼2010-05-03 20:00:38
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xiaoda1984

铁杆木虫 (著名写手)

小蛀虫
自己顶，请高手帮忙啊
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寄蜉蝣于天地，渺沧海之一粟、哀吾生之须臾，羡长江之无穷。
3楼2010-05-04 08:08:05
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wlfine82

木虫 (正式写手)
xiaoda1984(金币+1):ths，氨基柱可以做正相和反相，我用的是正相 2010-05-04 20:55:14
你的柱子是正相的还是反相的？光从色谱图上没法给出非常准确的答案，最好在加一些样品的信息
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4楼2010-05-04 08:15:24
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xkp123

木虫 (著名写手)
铁甲骑兵:正相柱能用水等强极性做流动相的嘛？ 2010-05-04 10:21
xiaoda1984(金币+1):增加水的比例，洗脱能力应该变弱吧 2010-05-04 20:57:17
应该是正相的吧，你第一个峰出峰时间太长了，所以得加大洗脱强度，所以水的比例要加大。具体的你要试下。
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5楼2010-05-04 08:49:35
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ss001

木虫 (著名写手)

财长就是财长
看不见图呢？
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天长等世事变云烟,地久待沧海化桑田
7楼2010-05-04 10:09:52
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xkp123

木虫 (著名写手)
xiaoda1984(金币+1):正相不能用水？ 2010-05-04 21:09:53
引用回帖:
Originally posted by xkp123 at 2010-05-04 08:49:35:
应该是正相的吧，你第一个峰出峰时间太长了，所以得加大洗脱强度，所以水的比例要加大。具体的你要试下。

氨基柱明显是用在正相咯，我的意思是想表达要加大流动相的洗脱强度，因为它明显保留时间太长，我知道正相不能用水，所以我也不知道这个条件怎么回事。
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8楼2010-05-04 10:54:45
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xkp123

木虫 (著名写手)
★
biore7456(金币+1):感谢参与！欢迎常来分析版！ 2010-05-04 21:08:30
xiaoda1984(金币+1):极性增强的话，出峰变快，分离效率应该变差吧？ 2010-05-04 21:09:22
氨基柱既可以做正相，又可以做反相，这个我还真不知道，如果可以做正相的话那么加大水的比例，增强了极性，自然洗脱能力增强拉
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9楼2010-05-04 21:02:58
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xkp123

木虫 (著名写手)
★
waiy2001(金币+1):谢谢交流，常来呀 2010-05-04 23:23:35
xiaoda1984(金币+1):ths，对于同一个样品，我分别试了70%，75%，80%的乙腈水溶液，发现乙腈越多出峰越慢，分离效果越好! 2010-05-05 07:37:03
LZ说极性增强，洗脱能力增大，分离效果变差。这是不对的吧，梯度洗脱一开始用洗脱能力弱的流动相是因为有些物质难于保留，流出柱子的速率很快的原因，既然你一开始用洗脱能力最弱比例的流动相保留时间那么长，所以你该提高流动相洗脱强度。而且你梯度变化的太大，所以你该一个比例一个比例试，这不是说清楚的，而是试出来的。
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10楼2010-05-04 21:37:47
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