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xiaoda1984

铁杆木虫 (著名写手)

小蛀虫

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[交流] 【求助】求教如何调整HPLC梯度已有8人参与

本人使用氨基柱，紫外检测器，梯度见下：

time 流速水乙腈
0 0.8 0 100%
30 0.8 50% 50%

结果见图,第一个峰保留时间为21min
请问如何调整梯度，使所有峰保留时间缩短，并且峰分的更开？

[ Last edited by xiaoda1984 on 2010-5-3 at 19:32 ]

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寄蜉蝣于天地，渺沧海之一粟、哀吾生之须臾，羡长江之无穷。

1楼2010-05-03 19:30:25

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xkp123

木虫 (著名写手)

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★
waiy2001(金币+1):谢谢交流，常来呀 2010-05-04 23:23:35
xiaoda1984(金币+1):ths，对于同一个样品，我分别试了70%，75%，80%的乙腈水溶液，发现乙腈越多出峰越慢，分离效果越好! 2010-05-05 07:37:03

LZ说极性增强，洗脱能力增大，分离效果变差。这是不对的吧，梯度洗脱一开始用洗脱能力弱的流动相是因为有些物质难于保留，流出柱子的速率很快的原因，既然你一开始用洗脱能力最弱比例的流动相保留时间那么长，所以你该提高流动相洗脱强度。而且你梯度变化的太大，所以你该一个比例一个比例试，这不是说清楚的，而是试出来的。