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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】HPLC梯度洗脱
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zhuiyu_

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助】HPLC梯度洗脱已有4人参与

最近要做一个中间体的检测，只有一个不是很清楚的文献条件，梯度洗脱：50/50 v/v  to  100/0  v/v  gradient CH3CN/H2O  over 25 min, 流速1.5，Zorbax-C8色谱柱。
有几个不明白的地方，C8柱能用1.5的流速冲吗？还有就是这个梯度该如何进行。平时接触的梯度不是很多，好像一般都要有缓冲平衡时间，这个该怎么设置？
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1楼2010-08-06 09:32:33
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luomuwuhen

金虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
happy169(金币+1):谢谢参与，欢迎常来分析版 2010-08-06 11:07:57
只要是柱子压力不是太大的话就可以用大流速冲，这程序应该是开始用50:50的比例冲，然后调节25min内由50:50渐变到100:0，最好再设定25min到35min内由100:0回到50:50。
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药物合成
2楼2010-08-06 09:39:44
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zhuiyu_

金虫 (正式写手)
谢谢了
是不是一开始就变换流动相比例了，不用50：50平衡个5分钟或者10分钟？
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3楼2010-08-06 12:58:32
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luomuwuhen

金虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
opq691(金币+1):感谢参与交流，欢迎常来分析版 2010-08-06 21:59:48
引用回帖:
Originally posted by zhuiyu_ at 2010-08-06 12:58:32:
谢谢了
是不是一开始就变换流动相比例了，不用50：50平衡个5分钟或者10分钟？

先用50:50的比例平衡柱子，平衡好了再走梯度，进样前先走空白溶剂梯度
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药物合成
4楼2010-08-06 13:50:08
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xkp123

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by luomuwuhen at 2010-08-06 13:50:08:

先用50:50的比例平衡柱子，平衡好了再走梯度，进样前先走空白溶剂梯度

走溶剂空白梯度的目的是什么？
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5楼2010-08-06 14:12:42
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zhuiyu_

金虫 (正式写手)
★
opq691(金币+1):感谢参与交流，欢迎常来分析版 2010-08-06 22:00:03
梯度洗脱一般会有梯度峰，为了样品进样后，计算浓度时候扣除梯度峰
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6楼2010-08-06 15:16:27
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xkp123

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by zhuiyu_ at 2010-08-06 15:16:27:
梯度洗脱一般会有梯度峰，为了样品进样后，计算浓度时候扣除梯度峰

哦，是这个原因，谢啦
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7楼2010-08-06 20:19:13
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xiaochun85

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
opq691(金币+1):谢谢参与，欢迎常来分析版 2010-08-21 23:59:11
梯度洗脱进空白还有个目的，就是让系统适应这个梯度。。。
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8楼2010-08-17 21:24:08
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