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zhuiyu_

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助】HPLC梯度洗脱 已有4人参与

最近要做一个中间体的检测,只有一个不是很清楚的文献条件,梯度洗脱:50/50 v/v  to  100/0  v/v  gradient CH3CN/H2O  over 25 min, 流速1.5,Zorbax-C8色谱柱。
有几个不明白的地方,C8柱能用1.5的流速冲吗?还有就是这个梯度该如何进行。平时接触的梯度不是很多,好像一般都要有缓冲平衡时间,这个该怎么设置?
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luomuwuhen

金虫 (著名写手)

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happy169(金币+1):谢谢参与,欢迎常来分析版 2010-08-06 11:07:57
只要是柱子压力不是太大的话就可以用大流速冲,这程序应该是开始用50:50的比例冲,然后调节25min内由50:50渐变到100:0,最好再设定25min到35min内由100:0回到50:50。
药物合成
2楼2010-08-06 09:39:44
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zhuiyu_

金虫 (正式写手)

谢谢了
是不是一开始就变换流动相比例了,不用50:50平衡个5分钟或者10分钟?
3楼2010-08-06 12:58:32
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luomuwuhen

金虫 (著名写手)

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opq691(金币+1):感谢参与交流,欢迎常来分析版 2010-08-06 21:59:48
引用回帖:
Originally posted by zhuiyu_ at 2010-08-06 12:58:32:
谢谢了
是不是一开始就变换流动相比例了,不用50:50平衡个5分钟或者10分钟?

先用50:50的比例平衡柱子,平衡好了再走梯度,进样前先走空白溶剂梯度
药物合成
4楼2010-08-06 13:50:08
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xkp123

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by luomuwuhen at 2010-08-06 13:50:08:

先用50:50的比例平衡柱子,平衡好了再走梯度,进样前先走空白溶剂梯度

走溶剂空白梯度的目的是什么?
5楼2010-08-06 14:12:42
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zhuiyu_

金虫 (正式写手)


opq691(金币+1):感谢参与交流,欢迎常来分析版 2010-08-06 22:00:03
梯度洗脱一般会有梯度峰,为了样品进样后,计算浓度时候扣除梯度峰
6楼2010-08-06 15:16:27
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xkp123

木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by zhuiyu_ at 2010-08-06 15:16:27:
梯度洗脱一般会有梯度峰,为了样品进样后,计算浓度时候扣除梯度峰

哦,是这个原因,谢啦
7楼2010-08-06 20:19:13
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xiaochun85

银虫 (小有名气)

★ ★
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opq691(金币+1):谢谢参与,欢迎常来分析版 2010-08-21 23:59:11
梯度洗脱进空白还有个目的,就是让系统适应这个梯度。。。
8楼2010-08-17 21:24:08
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