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【求助】HPLC梯度洗脱
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zhuiyu_
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【求助】HPLC梯度洗脱
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最近要做一个中间体的检测,只有一个不是很清楚的文献条件,梯度洗脱:50/50 v/v to 100/0 v/v gradient CH3CN/H2O over 25 min, 流速1.5,Zorbax-C8色谱柱。
有几个不明白的地方,C8柱能用1.5的流速冲吗?还有就是这个梯度该如何进行。平时接触的梯度不是很多,好像一般都要有缓冲平衡时间,这个该怎么设置?
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1楼
2010-08-06 09:32:33
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zhuiyu_
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★
opq691(金币+1):感谢参与交流,欢迎常来分析版 2010-08-06 22:00:03
梯度洗脱一般会有梯度峰,为了样品进样后,计算浓度时候扣除梯度峰
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6楼
2010-08-06 15:16:27
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luomuwuhen
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小木虫(金币
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):给个红包,谢谢回帖交流
happy169(金币+1):谢谢参与,欢迎常来分析版 2010-08-06 11:07:57
只要是柱子压力不是太大的话就可以用大流速冲,这程序应该是开始用50:50的比例冲,然后调节25min内由50:50渐变到100:0,最好再设定25min到35min内由100:0回到50:50。
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药物合成
2楼
2010-08-06 09:39:44
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谢谢了
是不是一开始就变换流动相比例了,不用50:50平衡个5分钟或者10分钟?
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3楼
2010-08-06 12:58:32
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):给个红包,谢谢回帖交流
opq691(金币+1):感谢参与交流,欢迎常来分析版 2010-08-06 21:59:48
引用回帖:
Originally posted by
zhuiyu_
at 2010-08-06 12:58:32:
谢谢了
是不是一开始就变换流动相比例了,不用50:50平衡个5分钟或者10分钟?
先用50:50的比例平衡柱子,平衡好了再走梯度,进样前先走空白溶剂梯度
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药物合成
4楼
2010-08-06 13:50:08
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