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xucheng104

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】梯度洗脱程序的设置 已有2人参与

梯度洗脱程序的设置有何规律?有机溶剂的比例高了是不是会缩短出峰时间,但是分离效果会变差,反之,缓冲盐的比例增加的话是不是分离效果就会好一些,但出峰时间延长?不是很清楚,还请各位大侠赐教啊!!!
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sunnycat

铜虫 (小有名气)

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需要看是什么样的柱子,正相还是反相,分配还是吸附色谱?还有检测器是什么?例如示差检测器就不能用于梯度洗脱。常用的反相色谱,梯度洗脱一般是改善分离度,缩短目标化合物出峰时间,实现复杂化合物的有效分离。增加流动相中有机相的含量,可以增加保留时间。
2楼2010-01-09 17:28:21
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smallsv

金虫 (正式写手)

叨叨

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二楼说的很清楚了,学习了。梯度洗脱分离效果更清楚了,需要更长的时间
叨叨
3楼2010-01-09 20:35:41
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myqwyp

金虫 (小有名气)

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2楼:需要看是什么样的柱子,正相还是反相,分配还是吸附色谱?还有检测器是什么?例如示差检测器就不能用于梯度洗脱。常用的反相色谱,梯度洗脱一般是改善分离度,缩短目标化合物出峰时间,实现复杂化合物的有效分离。增加流动相中有机相的含量,可以增加保留时间。
    个人认为.在反相色谱中,增加流动相有机相含量,应该是缩短保留时间
4楼2010-01-11 21:58:36
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sunnycat

铜虫 (小有名气)

对不起,说错了,在反相柱,增加水相才是增加保留时间。
5楼2010-01-11 22:26:43
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乔伊09

木虫 (小有名气)

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最近要做这方面的内容,关于梯度淋洗感觉还是有一点困难,不知道程序设置是怎么样的。看到上面的回帖,稍微明了了,感谢大家。
6楼2010-01-12 08:42:51
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wgx1128

金虫 (正式写手)

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最常用的方法,对于做研发而言,25厘米的柱子,10%有机溶剂2分钟,开始增加有机溶剂比例15分钟到100%,再走5分钟,就可以了,能冲下来几乎所有的东西。也许很多人认为有机溶剂不用增加到100%,我试验过,对于极性特别小的化合物不行,所以我加了对于做研发而言。
选择快乐!
7楼2010-01-12 08:49:47
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luoqinfly

银虫 (小有名气)

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学习了,非常感谢
8楼2010-04-28 10:52:28
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s1d2w2

木虫 (正式写手)

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一般而言梯度洗脱的设置一般用于多种物质的分离,你可以观察一下每种物质在不同的流动相壁垒条件下分离的效果。然后根据他们的保留时间和分离效果进行程序的设置。一般物质较多时,我们大体会牺牲一下分离度,但是你主要的检测物质是不会牺牲分离度的。这样做做可以缩短检测时间的
9楼2010-06-08 16:47:27
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