应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 资料求助 » 液相梯度洗脱时流动相梯度变化速度与出峰时间的关系
181/2返回列表12下一页
查看: 5126  |  回复: 17
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

无聊先森

银虫 (小有名气)

[求助] 液相梯度洗脱时流动相梯度变化速度与出峰时间的关系

反相时使用梯度洗脱，流动相的梯度变化速度和出峰时间有什么关系吗？为什么我计算出来的在相应流动相浓度下并没有出现该出现的峰呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-04-15 22:06:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有1个 )

无聊先森

银虫 (小有名气)
痴夷子皮: 回帖置顶 2013-04-22 08:30:49
图片的这呢哦，  各位大神看看有什么意见呢 有什么方法呢？ 各显神通吧！

图片1.jpg
赞一下 回复此楼
12楼2013-04-18 16:11:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

duliuhui

金虫 (正式写手)
★ ★
痴夷子皮: 金币+2, 热心奖励。 2013-04-17 08:29:40
楼主在梯度出峰时看到的流动相比例，实际上只是当时比例阀的混合浓度，并不是该组份分离时的比例。你可以想一下，从泵到柱子到检测器还是有一段时间的，所以你应该看扣除延迟时间时的比例或者再低一些再去试验。另外，有时单纯改变梯度比例也无法得到有效的分离，改变色谱柱、流动相pH、有机相或缓冲盐都可能有不同的效果。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下(4人) 回复此楼
11楼2013-04-16 21:18:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

duliuhui

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
痴夷子皮: 金币+1, 谢谢交流，欢迎常来哦。 2013-04-16 08:47:05
梯度变化与保留时间当然有关系了，反相上如C18柱一般按极性大小顺序洗脱，极性越小保留越大。另外填料类型、流动相pH都对保留有较大影响。
梯度变化速度快，相应出峰会更早。不知楼主是如何计算出峰时间的？
赞一下 回复此楼
2楼2013-04-15 22:46:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

456895

禁虫 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
3楼2013-04-16 10:34:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

feng100381

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主怎么计算的？
你看到流动相入口处到了你计算的浓度，柱子里再到你需要的浓度是有延迟的。
即使到了相应的浓度，流动相和样品也要有相互作用的过程。
梯度洗脱靠计算来估计保留时间比较困难。
赞一下 回复此楼
蛋白
4楼2013-04-16 10:59:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

无聊先森

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by duliuhui at 2013-04-15 22:46:08
梯度变化与保留时间当然有关系了，反相上如C18柱一般按极性大小顺序洗脱，极性越小保留越大。另外填料类型、流动相pH都对保留有较大影响。
梯度变化速度快，相应出峰会更早。不知楼主是如何计算出峰时间的？

A泵是缓冲盐，B泵是乙腈。我先用乙腈从百分之十到百分之百跑60min，看出峰时间，再根据出峰时间算出乙腈浓度，并算得其梯度。按理说，出峰会依据理论来，可完全不一样，这是为什么呢？
赞一下 回复此楼
5楼2013-04-16 11:02:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

无聊先森

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by feng100381 at 2013-04-16 10:59:51
楼主怎么计算的？
你看到流动相入口处到了你计算的浓度，柱子里再到你需要的浓度是有延迟的。
即使到了相应的浓度，流动相和样品也要有相互作用的过程。
梯度洗脱靠计算来估计保留时间比较困难。

30min后才出峰，且出的峰与之前的峰相比，峰形与峰高都完全不一样是怎么回事呢？
赞一下 回复此楼
6楼2013-04-16 13:22:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

feng100381

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
痴夷子皮: 金币+1, 热心奖励。 2013-04-17 08:29:23
引用回帖:
5楼: Originally posted by 无聊先森 at 2013-04-16 11:02:10
A泵是缓冲盐，B泵是乙腈。我先用乙腈从百分之十到百分之百跑60min，看出峰时间，再根据出峰时间算出乙腈浓度，并算得其梯度。按理说，出峰会依据理论来，可完全不一样，这是为什么呢？...

什么意思？第一次梯度洗，然后根据出峰时的乙腈浓度，再用这一浓度的流动相洗脱是吗？还是第二次依然是线性梯度，只不过缩小了时间和乙腈的终浓度百分比？
赞一下 回复此楼
蛋白
7楼2013-04-16 13:51:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

无聊先森

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by feng100381 at 2013-04-16 13:51:20
什么意思？第一次梯度洗，然后根据出峰时的乙腈浓度，再用这一浓度的流动相洗脱是吗？还是第二次依然是线性梯度，只不过缩小了时间和乙腈的终浓度百分比？...

我是根据出峰时的乙腈浓度来设置梯度的，想让出峰时间很近的两个峰分离，就根据他们的乙腈浓度设置中间停留时间（相同浓度停留时间）。我觉得这样应该能够分离的，可实际上完全不行，为什么呢？请问我这样做不行么？
赞一下 回复此楼
8楼2013-04-16 16:23:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

feng100381

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
无聊先森: 金币+10, ★有帮助, 谢谢提醒，我试着去调小乙腈的浓度试试。 2013-04-16 19:08:51
引用回帖:
8楼: Originally posted by 无聊先森 at 2013-04-16 16:23:11
我是根据出峰时的乙腈浓度来设置梯度的，想让出峰时间很近的两个峰分离，就根据他们的乙腈浓度设置中间停留时间（相同浓度停留时间）。我觉得这样应该能够分离的，可实际上完全不行，为什么呢？请问我这样做不行么 ...

搞个图上来看看吧。梯度图和色谱图。”相同浓度停留“的乙腈浓度可以调小点试试
只评梯度拉不开的话，也许你需要改改其他条件优化一下
赞一下 回复此楼
蛋白
9楼2013-04-16 16:48:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

无聊先森

银虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by feng100381 at 2013-04-16 16:48:50
搞个图上来看看吧。梯度图和色谱图。”相同浓度停留“的乙腈浓度可以调小点试试
只评梯度拉不开的话，也许你需要改改其他条件优化一下...

请问还有什么可能的原因么？现在图谱不在这，明天我上传下，请高人帮忙分析
赞一下 回复此楼
10楼2013-04-16 19:10:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 无聊先森 的主题更新
181/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +5 process2012 2026-08-23 6/300 2026-08-25 08:44 by 白大多亮
[基金申请] 我面上完蛋了 +12 且听虎啸 2026-08-20 13/650 2026-08-25 08:42 by 绘中天
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +25 yaoyewhu2008 2026-08-20 27/1350 2026-08-25 08:01 by Equinoxhua
[基金申请] 明天应该可查了！？ +5 chengyan1220 2026-08-23 5/250 2026-08-24 23:28 by 我4大白菜
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +7 scalable 2026-08-24 7/350 2026-08-24 23:01 by anata1209
[基金申请] 人气不行了 +10 fansofjerry 2026-08-21 10/500 2026-08-24 21:03 by zhanghaozhu
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +14 ziyangfang 2026-08-19 17/850 2026-08-24 18:37 by 哈哈蛤？
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 估计是周四 +4 archvillain 2026-08-18 4/200 2026-08-24 13:53 by zzuzxg
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[基金申请] 放榜前的不淡定 20+4 snowwithsea 2026-08-19 17/850 2026-08-24 10:20 by echo8914667
[基金申请] 科研孤儿太难了 +18 我4大白菜 2026-08-20 19/950 2026-08-24 09:47 by 凯恩广盛催化分�
[基金申请] 什么时候开奖？ +10 CrisMessi 2026-08-18 11/550 2026-08-24 06:50 by 开心的小狮子
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭