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yilishanshan

木虫 (正式写手)

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[交流] 到底用不用梯度洗脱来做？

HPLC中，什么时候用梯度洗脱？
为什么同一个物质，可以用梯度洗脱来做，也可以不用梯度洗脱？
拿到一个物质，如何判断流动相是否采用梯度洗脱？梯度洗脱条件又是按什么来选择的？

这么问题没想明白，请大家帮忙说说!先谢过啦！

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1楼 2011-06-24 10:41:33

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zgf340631735

至尊木虫 (文坛精英)

★ ★
yilishanshan(金币+1):谢谢参与
jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2011-06-24 16:41:02
yilishanshan(金币+5): 谢谢，很全面！回复晚了，不好意思 2011-07-12 00:20:50

用不用梯度洗脱，主要看杂质的情况。
同一物质有梯度和等度两种条件时，梯度的认可度较高。
杂质与杂质、主峰、溶剂峰的分离度一定要好（不好的话就要用梯度）。
1、杂质和主成分极性相差很大，杂质一定要全部都能洗脱出来（有时等度情况下从两三个小时杂质也冲出不来，就必须考虑等度）。
2、杂质和主成分极性相差较大，杂质出峰太晚（等度冲两个小时出来个杂质，就可以通过梯度缩短检样时间）
3、还有就是杂质极性比主峰的大，等度时要想主峰时间合适杂质全堆在前边，杂质分开主峰又出峰太晚，这种情况也得考虑梯度洗脱。