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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 到底用不用梯度洗脱来做？
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yilishanshan

木虫 (正式写手)

[交流] 到底用不用梯度洗脱来做？

HPLC中，什么时候用梯度洗脱？
为什么同一个物质，可以用梯度洗脱来做，也可以不用梯度洗脱？
拿到一个物质，如何判断流动相是否采用梯度洗脱？梯度洗脱条件又是按什么来选择的？

这么问题没想明白，请大家帮忙说说!先谢过啦！
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1楼 2011-06-24 10:41:33
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zgf340631735

至尊木虫 (文坛精英)
★ ★
yilishanshan(金币+1):谢谢参与
jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2011-06-24 16:41:02
yilishanshan(金币+5): 谢谢，很全面！回复晚了，不好意思 2011-07-12 00:20:50
用不用梯度洗脱，主要看杂质的情况。
同一物质有梯度和等度两种条件时，梯度的认可度较高。
杂质与杂质、主峰、溶剂峰的分离度一定要好（不好的话就要用梯度）。
1、杂质和主成分极性相差很大，杂质一定要全部都能洗脱出来（有时等度情况下从两三个小时杂质也冲出不来，就必须考虑等度）。
2、杂质和主成分极性相差较大，杂质出峰太晚（等度冲两个小时出来个杂质，就可以通过梯度缩短检样时间）
3、还有就是杂质极性比主峰的大，等度时要想主峰时间合适杂质全堆在前边，杂质分开主峰又出峰太晚，这种情况也得考虑梯度洗脱。
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2楼2011-06-24 11:32:49
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zgf340631735

至尊木虫 (文坛精英)
可以在网上多查查相关资料。
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3楼2011-07-12 12:26:05
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jiao63415719

银虫 (著名写手)
★
yilishanshan(金币+1):谢谢参与
那种情况的分离度好就用那种啊1
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4楼2011-07-12 17:58:01
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hugh_811

金虫 (小有名气)
★
yilishanshan(金币+1):谢谢参与
主要还是要看样品和杂质的分离效果吧
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5楼2011-07-12 18:23:59
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zp20100601

新虫 (小有名气)
★
yilishanshan(金币+1):谢谢参与
看时间和分析的目的来定了 如果是指纹图谱 希望每个成分都分离的好 当然是梯度的好了 如果单纯的只看一个物质 就看分析的时间来决定了
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6楼2011-07-26 22:43:16
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zf553768304

新虫 (初入文坛)
★
yilishanshan(金币+1):谢谢参与
在能达到较好的分离度的情况下能用等度就用等度，不行的话再考虑用梯度洗脱。具体的条件就要通过实验考查了，没有现成的条件。
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7楼2011-07-26 23:13:55
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da1234mao

铁虫 (著名写手)
主要看你的样品中的分离度啊，
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8楼2012-01-06 00:30:43
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staffyujay

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
梯度洗脱可以缩短出峰时间，改善峰型~不过你得保证各组分有足够的分离度
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9楼2013-04-17 11:05:45
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