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无聊先森

银虫 (小有名气)

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[求助] 液相梯度洗脱时流动相梯度变化速度与出峰时间的关系

反相时使用梯度洗脱，流动相的梯度变化速度和出峰时间有什么关系吗？为什么我计算出来的在相应流动相浓度下并没有出现该出现的峰呢？

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1楼2013-04-15 22:06:06

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duliuhui

金虫 (正式写手)

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★ ★
痴夷子皮: 金币+2, 热心奖励。 2013-04-17 08:29:40

楼主在梯度出峰时看到的流动相比例，实际上只是当时比例阀的混合浓度，并不是该组份分离时的比例。你可以想一下，从泵到柱子到检测器还是有一段时间的，所以你应该看扣除延迟时间时的比例或者再低一些再去试验。另外，有时单纯改变梯度比例也无法得到有效的分离，改变色谱柱、流动相pH、有机相或缓冲盐都可能有不同的效果。

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