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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 重金求助关于离子交换树脂层析柱分离中性多糖的操作，先行谢谢各位
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jimmychen

金虫 (小有名气)

[求助] 重金求助关于离子交换树脂层析柱分离中性多糖的操作，先行谢谢各位

小弟最近在做一个活性物质分离纯化，发酵一种真菌，上清液中含有活性物质，是一中性多糖，想通过离子交换树脂法来进一步除杂，因第一次研究，望有经验的师兄师姐们帮帮忙。。。谢谢非常
      查阅的关于离子交换树脂的文献，知道硼酸与多糖产生反应形成有阴离子的复合物，因而用阴离子交换树脂，现在小弟有以下几个问题：
       1.阴离子交换树脂我应该选哪种类型，应该选什么样的柱子，树脂量一般是多少？
       2.进样前，样品怎样处理，进样时应保持怎样的浓度，也即是稀释到几十毫升还是保持浓缩后的几毫升进样？
       3.硼酸与中性多糖反应是在样品进样前放在一起处理，还是用硼酸处理柱子中的阴离子交换树脂？
       4.我查过一篇文献，讲的是进过样后用分别用水，0.05 M硼酸溶液、0.08 M硼酸溶液和0.5 M NaOH溶液洗脱。。。。。要是用硼酸处理柱子树脂，应该用多少浓度的硼酸啊。。。NaOH溶液是起柱子再生作用吗？
       5.带有硼酸和中性多糖的流分怎么进行检测和分离开啊


      问题比较多， 先在此谢谢
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trying，trying，trying
1楼2011-09-09 20:37:04
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jimmychen

金虫 (小有名气)
有没有知道的，拜托了。。。
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trying，trying，trying
2楼2011-09-09 22:09:12
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会思想的芦苇

金虫 (正式写手)
你不应该发在这里  去生物科学版面发吧  那里有纯化人才
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3楼2011-09-09 23:00:43
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荷塘爬虫

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

jimmychen(金币+30): 谢谢 2011-09-10 23:43:14
1、选哪种类型的树脂要通过实验筛选，柱子的大小与树脂装量由发酵液的处理量决定，一般一个批次的发酵液要一次处理清楚
2、浓缩液进样
3、.硼酸与中性多糖反应是在样品进样前放在一起处理
4、硼酸是解析液，NaOH溶液是起柱子再生作用
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4楼2011-09-10 07:06:21
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jimmychen

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 荷塘爬虫 at 2011-09-10 07:06:21:
1、选哪种类型的树脂要通过实验筛选，柱子的大小与树脂装量由发酵液的处理量决定，一般一个批次的发酵液要一次处理清楚
2、浓缩液进样
3、.硼酸与中性多糖反应是在样品进样前放在一起处理
4、硼酸是解析液，Na ...

那如题用的是0.05 M硼酸溶液、0.08 M硼酸溶液洗脱，那用的样品硼酸处理液是不是浓度比0.05 M小的硼酸溶液平衡处理啊。。。还有一般硼酸溶液用多少浓度处理啊，对于小柱子样品进样多少效果好啊。。。
还有就是用硼酸处理了样品，是不是柱子不用硼酸处理了，用水洗至平衡，然后进硼酸处理过的样品啊。。。。。。麻烦了，谢谢
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trying，trying，trying
5楼2011-09-10 23:10:49
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荷塘爬虫

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

jimmychen(金币+10): 谢谢，以后再向你请教 2011-09-11 18:02:28
引用回帖:
5楼: Originally posted by jimmychen at 2011-09-10 23:10:49:
那如题用的是0.05 M硼酸溶液、0.08 M硼酸溶液洗脱，那用的样品硼酸处理液是不是浓度比0.05 M小的硼酸溶液平衡处理啊。。。还有一般硼酸溶液用多少浓度处理啊，对于小柱子样品进样多少效果好啊。。。
还有就是用 ...

处理样品的硼酸浓度不一定比0.05小，因为硼酸还要与样品反应，但上柱的溶液一定小于0.05.还有......正确
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6楼2011-09-11 06:29:15
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chinanhui

捐助贵宾 (著名写手)

小木虫超级终身版主
祝福一下！
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7楼2011-09-11 06:56:09
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国际会议主席

捐助贵宾 (著名写手)

神马都是浮云
祝福一下！
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8楼2011-09-11 07:04:09
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xiaochong8693
祝福 ~~祝福
9楼2011-09-11 07:45:02
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hezhao999

木虫 (正式写手)
1.阴离子交换树脂我应该选哪种类型，应该选什么样的柱子，树脂量一般是多少？—— 一般用DEAE基团的，我们用GE的DEAE-sepharose 6 F.F. ,树脂用量跟样品量有关
2.进样前，样品怎样处理，进样时应保持怎样的浓度，也即是稀释到几十毫升还是保持浓缩后的几毫升进样——— 进样量还是几毫升为好。
3. 硼酸溶液没用过，不清楚
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10楼2011-09-13 10:43:49
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