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mouseludi

铁杆木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于离子交换层析的灌柱!!!!已有8人参与

最近开始做蛋白纯化,第一步要用离子交换层析色谱
但是每次灌柱后,里面都有很细小的小气泡,不仔细看可能看不到,请问怎么去除这些小气泡啊?
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月月大可

木虫 (著名写手)

mouseludi(金币+5): 2010-08-02 13:00:06
灌柱子前现在空柱子中加入水,排除下段气泡,封堵下端。然后开始加入填料,这样填料中的气泡会自己飘起来。必须让它靠重力自然沉降,如果这是打开下端放水填料快速下沉,中间的气泡就会被堵在填料里。
6楼2010-07-30 08:15:39
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普通回帖

yunwalking

金虫 (小有名气)


reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2010-07-30 08:19:31
mouseludi(金币+1):谢谢回复! 2010-08-02 13:00:19
引用回帖:
Originally posted by mouseludi at 2010-07-29 17:01:54:
最近开始做蛋白纯化,第一步要用离子交换层析色谱
但是每次灌柱后,里面都有很细小的小气泡,不仔细看可能看不到,请问怎么去除这些小气泡啊?

灌柱可能时间短  没压实
爱我中华~
2楼2010-07-29 17:24:03
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henkally

禁虫 (著名写手)

★ ★
amisking(金币+2):good! 2010-07-29 17:56:22
mouseludi(金币+1):谢谢回复!以后可以尝试下 2010-08-02 13:00:45
本帖内容被屏蔽

3楼2010-07-29 17:33:01
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waiter

木虫 (著名写手)

蛋白纯化系统(国产AKTA)销售


mouseludi(金币+1):谢谢回复!就是不能,所以要去除气泡嘛 2010-08-02 13:01:49
灌柱就是装柱吗?


怎么可能让它有气泡呢?

那样的柱效能通过吗?
4楼2010-07-29 22:20:46
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)


reasonspare(金币+1):这种态度虽然不鼓励,但是有点像我/ 2010-07-30 08:20:23
mouseludi(金币+1):可是气泡有点多啊,应该还是有影响的 2010-08-02 13:02:08
离子交换层析没有关系的,如果不放心就大流速反冲一下吧
5楼2010-07-30 07:54:09
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mouseludi

铁杆木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 月月大可 at 2010-07-30 08:15:39:
灌柱子前现在空柱子中加入水,排除下段气泡,封堵下端。然后开始加入填料,这样填料中的气泡会自己飘起来。必须让它靠重力自然沉降,如果这是打开下端放水填料快速下沉,中间的气泡就会被堵在填料里。

恩,我用着方法试了下,没有气泡了,确实好用,哈哈
7楼2010-08-02 12:59:52
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一夜不留痕

银虫 (初入文坛)

嗯 学到了装柱子了 哈 谢谢LZ开的这个帖子 我现在在做毕业论文都是 研究生帮我装的 嘿嘿!
最好不相见,如此便可不相恋
8楼2010-08-02 14:14:34
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waiter

木虫 (著名写手)

蛋白纯化系统(国产AKTA)销售


不知道楼主 用的什么类型的柱子和凝胶。。
http://www.ebiotrade.com/GE/AKTAclub7/index.html

GE的装柱
9楼2010-08-03 19:20:12
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sqhnsd

金虫 (正式写手)

很简单,建议楼主用20%的乙醇去灌注。因为加入有机溶剂之后,液体表面张力变化,泡泡就难以形成。另外,使用玻璃棒引流减少引入泡泡的机会,如果发现有泡泡,玻璃帮捅捅(溶液状态下,轻轻碰一下然后迅速抽回,使柱料在柱子中重新悬浮)。不建议大流速重新,很难凑效
10楼2010-08-04 10:15:35
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