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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于离子交换层析的灌柱！！！！
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mouseludi

铁杆木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于离子交换层析的灌柱！！！！ 已有8人参与

最近开始做蛋白纯化，第一步要用离子交换层析色谱
但是每次灌柱后，里面都有很细小的小气泡，不仔细看可能看不到，请问怎么去除这些小气泡啊？
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1楼 2010-07-29 17:01:54
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

月月大可

木虫 (著名写手)
mouseludi(金币+5): 2010-08-02 13:00:06
灌柱子前现在空柱子中加入水，排除下段气泡，封堵下端。然后开始加入填料，这样填料中的气泡会自己飘起来。必须让它靠重力自然沉降，如果这是打开下端放水填料快速下沉，中间的气泡就会被堵在填料里。
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6楼2010-07-30 08:15:39
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普通回帖

yunwalking

金虫 (小有名气)
★
reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2010-07-30 08:19:31
mouseludi(金币+1):谢谢回复！ 2010-08-02 13:00:19
引用回帖:
Originally posted by mouseludi at 2010-07-29 17:01:54:
最近开始做蛋白纯化，第一步要用离子交换层析色谱
但是每次灌柱后，里面都有很细小的小气泡，不仔细看可能看不到，请问怎么去除这些小气泡啊？

灌柱可能时间短  没压实
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爱我中华~
2楼2010-07-29 17:24:03
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henkally

禁虫 (著名写手)
★ ★
amisking(金币+2):good！ 2010-07-29 17:56:22
mouseludi(金币+1):谢谢回复！以后可以尝试下 2010-08-02 13:00:45
本帖内容被屏蔽
3楼2010-07-29 17:33:01
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waiter

木虫 (著名写手)

蛋白层析系统（国产）销售
mouseludi(金币+1):谢谢回复！就是不能，所以要去除气泡嘛 2010-08-02 13:01:49
灌柱就是装柱吗?


怎么可能让它有气泡呢？

那样的柱效能通过吗？
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4楼2010-07-29 22:20:46
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)
★
reasonspare(金币+1):这种态度虽然不鼓励，但是有点像我/ 2010-07-30 08:20:23
mouseludi(金币+1):可是气泡有点多啊，应该还是有影响的 2010-08-02 13:02:08
离子交换层析没有关系的，如果不放心就大流速反冲一下吧
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5楼2010-07-30 07:54:09
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mouseludi

铁杆木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 月月大可 at 2010-07-30 08:15:39:
灌柱子前现在空柱子中加入水，排除下段气泡，封堵下端。然后开始加入填料，这样填料中的气泡会自己飘起来。必须让它靠重力自然沉降，如果这是打开下端放水填料快速下沉，中间的气泡就会被堵在填料里。

恩，我用着方法试了下，没有气泡了，确实好用，哈哈
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7楼2010-08-02 12:59:52
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一夜不留痕

银虫 (初入文坛)
嗯 学到了装柱子了 哈 谢谢LZ开的这个帖子 我现在在做毕业论文都是 研究生帮我装的 嘿嘿！
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最好不相见，如此便可不相恋
8楼2010-08-02 14:14:34
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waiter

木虫 (著名写手)

蛋白层析系统（国产）销售
不知道楼主 用的什么类型的柱子和凝胶。。
http://www.ebiotrade.com/GE/AKTAclub7/index.html

GE的装柱
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9楼2010-08-03 19:20:12
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sqhnsd

金虫 (正式写手)
很简单，建议楼主用20%的乙醇去灌注。因为加入有机溶剂之后，液体表面张力变化，泡泡就难以形成。另外，使用玻璃棒引流减少引入泡泡的机会，如果发现有泡泡，玻璃帮捅捅（溶液状态下，轻轻碰一下然后迅速抽回，使柱料在柱子中重新悬浮）。不建议大流速重新，很难凑效
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10楼2010-08-04 10:15:35
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