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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 重金求助关于离子交换树脂层析柱分离中性多糖的操作，先行谢谢各位
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sdtasjz

新虫 (初入文坛)
DEAE
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11楼2011-09-28 21:04:25
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龙猫2585

铁虫 (初入文坛)
建议使用纤维素DEAE-52，树脂分离效果不好，只有脱色作用，DEAE-sepharose 6 F.F.对蛋白较好，但对多糖效果不怎样，较难摸索条件
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Thinkingstorm
12楼2012-03-05 14:30:49
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龙猫2585

铁虫 (初入文坛)
建议使用DEAE-52，而DEAE-sepharose 6 F.F对蛋白效果较好，对糖的分离效果不好
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Thinkingstorm
13楼2012-03-05 14:52:17
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hanxf0818

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
1387857楼: Originally posted by hezhao999 at 2011-09-13 10:43:49:
1.阴离子交换树脂我应该选哪种类型，应该选什么样的柱子，树脂量一般是多少？—— 一般用DEAE基团的，我们用GE的DEAE-sepharose 6 F.F. ,树脂用量跟样品量有关
2.进样前，样品怎样处理，进样时应保持怎样的浓度， ...

我现在DEAE-sepharose 6 F.F，也用请问您在纯化是怎么确定上样量的，我的在蒸馏水洗脱时有多糖，不能确定是中性糖还是酸性唐
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家有儿女888
14楼2012-03-21 11:13:13
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龙猫2585

铁虫 (初入文坛)
一篇文章说明不了问题，也许是我孤陋寡闻吧，多糖纯化见多了，还没见到用硼酸洗脱的，既然是中性多糖，如果分子量不是很大的话，上DEAE-52，用水就可以洗脱下来，接下来用氯化钠洗脱。再说，不论哪种菌和植物，都含有多种糖，你只说一种中性多糖，有点片面了，很多文章都是针对自己纯化的某一种糖来写的。还有我不知你的样品处理得到粗多糖了没有，有没有测一下含糖量？最好先处理得到干燥粗多糖。
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Thinkingstorm
15楼2012-03-30 11:15:36
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dnazyme

捐助贵宾 (知名作家)

老虫
你先搞清楚，主要杂质是什么，例如，蛋白质。然后看什么条件能够吸附杂质而不吸附多糖，把多糖洗下，杂质蛋白就吸附在柱子上了。其他带电杂质也是这个道理。
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博坊生物
16楼2012-05-15 21:24:09
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