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sdtasjz

新虫 (初入文坛)

11楼2011-09-28 21:04:25
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龙猫2585

铁虫 (初入文坛)

建议使用纤维素DEAE-52,树脂分离效果不好,只有脱色作用,DEAE-sepharose 6 F.F.对蛋白较好,但对多糖效果不怎样,较难摸索条件
Thinkingstorm
12楼2012-03-05 14:30:49
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龙猫2585

铁虫 (初入文坛)

建议使用DEAE-52,而DEAE-sepharose 6 F.F对蛋白效果较好,对糖的分离效果不好
Thinkingstorm
13楼2012-03-05 14:52:17
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hanxf0818

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
1387857楼: Originally posted by hezhao999 at 2011-09-13 10:43:49:
1.阴离子交换树脂我应该选哪种类型,应该选什么样的柱子,树脂量一般是多少?—— 一般用DEAE基团的,我们用GE的DEAE-sepharose 6 F.F. ,树脂用量跟样品量有关
2.进样前,样品怎样处理,进样时应保持怎样的浓度, ...

我现在DEAE-sepharose 6 F.F,也用请问您在纯化是怎么确定上样量的,我的在蒸馏水洗脱时有多糖,不能确定是中性糖还是酸性唐
家有儿女888
14楼2012-03-21 11:13:13
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龙猫2585

铁虫 (初入文坛)

一篇文章说明不了问题,也许是我孤陋寡闻吧,多糖纯化见多了,还没见到用硼酸洗脱的,既然是中性多糖,如果分子量不是很大的话,上DEAE-52,用水就可以洗脱下来,接下来用氯化钠洗脱。再说,不论哪种菌和植物,都含有多种糖,你只说一种中性多糖,有点片面了,很多文章都是针对自己纯化的某一种糖来写的。还有我不知你的样品处理得到粗多糖了没有,有没有测一下含糖量?最好先处理得到干燥粗多糖。
Thinkingstorm
15楼2012-03-30 11:15:36
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dnazyme

捐助贵宾 (知名作家)

老虫

你先搞清楚,主要杂质是什么,例如,蛋白质。然后看什么条件能够吸附杂质而不吸附多糖,把多糖洗下,杂质蛋白就吸附在柱子上了。其他带电杂质也是这个道理。
博坊生物
16楼2012-05-15 21:24:09
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