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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » 各位牛人 分离纯化多肽过离子交换层析 吸光度是负值是什么情况
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dandan_cece

铜虫 (正式写手)

[求助] 各位牛人 分离纯化多肽过离子交换层析 吸光度是负值是什么情况

我用NaCl线性洗脱，之后测吸光度，之前校过零了，怎么有的值会是负的？而且吸光度都很小，看文献有的吸光度都大于1了，我的最高的才0.1，请各位高手解惑啊啊啊
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1楼 2013-03-27 11:12:24
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dandan_cece

铜虫 (正式写手)
快来个人帮帮我吧
小妹做个实验不容易啊啊啊
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2楼2013-03-28 10:09:39
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普通回帖

lincyb

铜虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dandan_cece at 2013-03-28 10:09:39
快来个人帮帮我吧
小妹做个实验不容易啊啊啊

妹子实在不易，还自己顶自己的贴
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3楼2013-03-29 11:15:38
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dandan_cece

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lincyb at 2013-03-29 11:15:38
妹子实在不易，还自己顶自己的贴...

敢不敢回复个有技术含量的！！
赞一下 回复此楼
4楼2013-03-29 12:33:03
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
你用什么仪器做的，有没有作图表？
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
5楼2013-03-29 15:14:34
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tjuakasa

木虫 (著名写手)

神木王虫

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
dandan_cece: 金币+15, ★有帮助, 谢谢您 2013-04-01 13:53:18
太不详细了啊
先问你问题：
在线检测的？还是接取部分用紫外检测器检测？
一般以在线检测吧，wash之后到基线，再线性elution应该出峰，
这个峰如果很小，那就是吸附量很低；去找你的柱子和吸附条件的问题，别的原因可能性不大。
这个峰如果很大，你把它接到试管中了，去紫外测吸收，而吸收值很低，很可能你的对照组有问题
因为盐溶液对紫外吸收也有影响，不知你多肽是在什么波长测的。
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如切如磋，如琢如磨
6楼2013-03-29 15:42:21
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Alexalex19

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
校零出现问题了吧
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7楼2013-03-29 21:47:49
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lincyb

铜虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by dandan_cece at 2013-03-29 12:33:03
敢不敢回复个有技术含量的！！...

擦！！！你才发5个帖子。都斑竹了啦！
斑竹大人你好
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8楼2013-04-01 09:12:19
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dandan_cece

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2013-03-29 15:14:34
你用什么仪器做的，有没有作图表？

UV-1100型 紫外可见光分光光度计
没有做表的
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9楼2013-04-01 13:44:59
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dandan_cece

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by tjuakasa at 2013-03-29 15:42:21
太不详细了啊
先问你问题：
在线检测的？还是接取部分用紫外检测器检测？
一般以在线检测吧，wash之后到基线，再线性elution应该出峰，
这个峰如果很小，那就是吸附量很低；去找你的柱子和吸附条件的问题，别的 ...

是接取部分用紫外检测器检测的，多肽是在220nm测的，我是新手，第一次过柱子，看到文献里用SP Sephadex C-25这种填料纯化多肽，所以买来试试，神马都不懂
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10楼2013-04-01 13:47:41
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