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linglingerl

金虫 (初入文坛)

[求助] 过完阴离子交换柱后需要再过分子筛的蛋白处理方法

我提取的粗蛋白刚过完DEAE-纤维素阴离子交换柱得到两个峰,想要确定完这两个峰的酶活性之后再过分子筛,但是收集的这两个峰溶液体积很大,如果冻干的话会有盐析出来,如果是透析的话就是体积太大了,请问各位大虾有什么办法浓缩这个溶液再去上凝胶柱吗?
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同东中郎将

新虫 (小有名气)

可以超滤浓缩一下样品,你蛋白分子量多大的?选择合适的超滤膜可以浓缩蛋白。
曾子曰:“士不可以不弘毅,任重而道远。仁以为己任,不亦重乎?死而后已,不亦远乎?”
2楼2013-11-22 10:57:42
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linglingerl

金虫 (初入文坛)


137167741: 金币+1, 小木虫交流,共同进步~~ 2013-11-24 08:56:19
引用回帖:
2楼: Originally posted by 同东中郎将 at 2013-11-22 10:57:42
可以超滤浓缩一下样品,你蛋白分子量多大的?选择合适的超滤膜可以浓缩蛋白。

我只是分离某一活性的蛋白,所以分子量、等电点之类的东西都不清楚
如果是超滤,超滤离心可以吗?对于这种离心管有什么要求吗?
3楼2013-11-22 12:01:01
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kingtsar

禁虫 (小有名气)

感谢参与,应助指数 +1
本帖内容被屏蔽

4楼2013-11-22 13:47:51
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linglingerl

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by kingtsar at 2013-11-22 13:47:51
分离活性蛋白?什么活性? 抗氧化还是什么? 能具体说说么?

DNase
5楼2013-11-22 14:38:50
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
灌在透析袋里面,外面用PEG,把水洗出来
6楼2013-11-23 13:53:35
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kingtsar

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

7楼2013-11-23 21:28:55
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同东中郎将

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by linglingerl at 2013-11-22 12:01:01
我只是分离某一活性的蛋白,所以分子量、等电点之类的东西都不清楚
如果是超滤,超滤离心可以吗?对于这种离心管有什么要求吗?...

DNase百度,分子量在31KD左右,不知道你的是多少??
如果是31KD,你可以选择截留量为5KD的超滤离心管,进行浓缩。
浓缩至蛋白浓度10-20mg/ml,过分子筛看一看。
祝你好运。
曾子曰:“士不可以不弘毅,任重而道远。仁以为己任,不亦重乎?死而后已,不亦远乎?”
8楼2013-11-24 12:58:30
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流浪天涯2013

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

超滤离心是可以的,我也在用,看你的蛋白大小,选取合适截流量的离心管就行
9楼2013-12-02 09:46:32
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shabier

银虫 (小有名气)


【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by linglingerl at 2013-11-22 12:01:01
我只是分离某一活性的蛋白,所以分子量、等电点之类的东西都不清楚
如果是超滤,超滤离心可以吗?对于这种离心管有什么要求吗?...

不知道等电点怎么过的离子层析,还是阴离子层析

[ 发自小木虫客户端 ]
10楼2013-12-02 12:48:54
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