| 查看: 2872 | 回复: 1 | ||
[求助]
RT-PCR 2△△Ct法，阴性对照与目标基因PCR后产物的溶解曲线和跑胶条带几乎一样？已有1人参与
|
|
各位大神： 第一次发帖，十分紧急！麻烦帮忙回答一下以下问题： 个人做RT-PCR 荧光实时相对定量，用的是 2△△Ct法，但是阴性对照NTC与加了模板的目标基因PCR后产物的溶解曲线和跑胶条带几乎一样！ 而且：①目标基因与NTC的Ct值仅相差不到5；②NTC的溶解曲线起峰单一且高度与目标基因相近；③琼脂糖跑胶结果，两者条带亮度与位置也几乎相同。 个人使用的是一次性无菌枪头，勤换PE手套，操作台为超净台，PCR扩增体系也更换过，今天还重新订了引物重新稀释（以防引物已被污染），但情况没有好转。 有人说可能是污染，让我订滤芯枪头看情况是否好转。 请问，污染可能只污染目标基因么？因为我的目标基因P有这个问题，但是管家基因G就没有这个问题，都是一个板子做出来的。 具体情况在图上，希望各位大神多多提意见！谢谢！  1.png  2.png  3.png |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有192人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
荧光定量PCR 扩增曲线求助
已经有24人回复- RT-PCR过程中内参基因CT值问题
已经有6人回复
- 如何用western或RT-PCR判断细胞NF-KB组成型表达，阴性/阳性对照需要吗，是什么？
已经有3人回复
- [求助]PCR后跑胶结果如图，请大家帮忙分析一下，谢谢各位
已经有4人回复
- 做荧光定量PCR,如果对照组的目的基因不表达,在采用2-△△Ct时怎么处理数据
已经有6人回复
- 定量PCR-引物二聚体问题
已经有5人回复
- 荧光定量溶解曲线怎么回事？
已经有11人回复
- 使用多对引物进行实时定量PCR后未得到实验结果，是否能说明目的基因不表达？
已经有10人回复
- QPCR 溶解曲线
已经有9人回复
- 新手求助PCR产物Blast问题，先谢谢大家了
已经有11人回复
- real-time PCR相对定量2 -△△CT法中用来判断扩增效率的标准曲线怎么制作？
已经有8人回复
- PCR 溶解曲线乱、ct值高 怎么办
已经有12人回复
- PCR空白跑出了与目的基因一样的一条浅带
已经有16人回复
- real time PCR 溶解曲线 目的产物后又出一个峰 怎么回事
已经有5人回复
- 试剂盒提取细菌DNA后，跑胶检测有条带，但是PCR后却无扩增产物。
已经有10人回复
- SYBR荧光定量的溶解曲线
已经有10人回复
- 求解：实时荧光定量PCR奇峰
已经有18人回复
- rt-pcr图，请大神们帮助分析一下，急。。。谢谢。。。
已经有20人回复
- 急求RT-PCR电泳图分析
已经有22人回复
- PCR产物跑胶跑不动，什么原因？
已经有10人回复
- RT-PCR扩增图和溶解曲线跑成这样
已经有12人回复
- PCR产物回收之后跑胶浓度过低
已经有17人回复
- 反转录后PCR无条带
已经有5人回复
- 荧光定量PCR(相对定量)的分析结果2-△△Ct怎么看呀?
已经有31人回复
- 【求助/交流】做培养细胞的RT-PCR，β-actin内参出现两个条带，求原因。
已经有10人回复
- 【分享】realtime pcr 个人经验分享
已经有41人回复
2楼2014-07-24 21:13:15