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yanhuazh2008金虫 (小有名气)
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real time PCR 溶解曲线 目的产物后又出一个峰 怎么回事
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real time PCR 溶解曲线 目的产物后又出一个峰 之前做了几次都没出现过 到底是社么 |
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小丹木木: 金币+3, MolEPI+1, 很热心的回复，热心的虫虫 2012-07-06 13:42:06
yanhuazh2008: 金币+8, ★★★很有帮助 2012-07-09 09:54:57
小丹木木: 金币+3, MolEPI+1, 很热心的回复，热心的虫虫 2012-07-06 13:42:06
yanhuazh2008: 金币+8, ★★★很有帮助 2012-07-09 09:54:57
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出现了其他的峰造成的原因肯定是产物不纯，但是我想分几个方面还做分析： 1.环境污染或者说人为操作的污染，这方面的因素我想可以第一个来排除，因为你之前做的样品没有其他的峰，要是前后都是在一个地方做实验的话应该不会出现环境污染，另外因为两次结果的都有杂峰出现，所以人为因素也不是很有可能。 2.引物的污染或者样品的污染。我觉得这两者的污染的可能性是很大的，但是换一种思路来想的话，要单单是样品污染的话应该不会只扩出来一个杂峰，所以我想可能是因为引物的污染 3.退火温度稍低而导致的非特异性扩增。这一点的话因为你之前扩的没有问题，这一点可能不会产生影响，但是也不能排除仪器的前后误差。 希望我的解释可以帮助到你~ |
5楼2012-07-05 21:21:27
yuzhiming
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