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yesali

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[求助] Real-time PCR溶解曲线Tm值，是不是在不同的仪器上做出来的不一样？

最近在做qPCR，引物是按照国外文献提供的序列合成的，实验发现扩增产物的溶解曲线是单一的峰，但是Tm分国外文献不一样，有的相差接近5摄氏度（文献表明53.35，而我自己做的是81.69）。
请问各位，Tm值会不会受不同仪器、不同试剂的影响？变化幅度在什么范围内能够接受，谢谢！

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1楼2013-06-22 15:14:54

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cicelyzh

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yesali(myprayer代发): 金币+1, Gifts of roses, hand there are lingering fragrance. Look forward to your wonderful and more detailed answer. 2013-06-23 12:36:15

53.35不可能是熔解曲线的tm吧，我觉得应该指的是引物的退火温度。一般qPCR产物的tm是八十多度的。

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2楼2013-06-23 01:37:09

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cicelyzh

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yesali: 金币+1 2013-06-24 20:18:04

Tm是和产物直接相关的，应该不会与仪器相关，但可能与不同qPCR的盒子有一点点关系，即使不同也是非常小的差别。

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3楼2013-06-23 01:39:19

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