应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » Real-time PCR溶解曲线Tm值，是不是在不同的仪器上做出来的不一样？
61/1返回列表
查看: 4005  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yesali

木虫 (正式写手)

[求助] Real-time PCR溶解曲线Tm值，是不是在不同的仪器上做出来的不一样？

最近在做qPCR，引物是按照国外文献提供的序列合成的，实验发现扩增产物的溶解曲线是单一的峰，但是Tm分国外文献不一样，有的相差接近5摄氏度（文献表明53.35，而我自己做的是81.69）。
请问各位，Tm值会不会受不同仪器、不同试剂的影响？变化幅度在什么范围内能够接受，谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-06-22 15:14:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
yesali(myprayer代发): 金币+1, Gifts of roses, hand there are lingering fragrance. Look forward to your wonderful and more detailed answer. 2013-06-23 12:36:15
53.35不可能是熔解曲线的tm吧，我觉得应该指的是引物的退火温度。一般qPCR产物的tm是八十多度的。
赞一下 回复此楼
2楼2013-06-23 01:37:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
yesali(myprayer代发): 金币+1, Gifts of roses, hand there are lingering fragrance. Look forward to your wonderful and more detailed answer. 2013-06-23 12:36:23
yesali: 金币+1 2013-06-24 20:18:04
Tm是和产物直接相关的，应该不会与仪器相关，但可能与不同qPCR的盒子有一点点关系，即使不同也是非常小的差别。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2013-06-23 01:39:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yesali

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-06-23 01:37:09
53.35不可能是熔解曲线的tm吧，我觉得应该指的是引物的退火温度。一般qPCR产物的tm是八十多度的。

不好意思，弄错了，是83.35
赞一下 回复此楼
4楼2013-06-24 20:16:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by yesali at 2013-06-24 20:16:50
不好意思，弄错了，是83.35...

用的是同一种荧光染料吗？
赞一下 回复此楼
5楼2013-06-24 23:04:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

taccycle

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-06-23 01:39:19
Tm是和产物直接相关的，应该不会与仪器相关，但可能与不同qPCR的盒子有一点点关系，即使不同也是非常小的差别。

楼上正解，Tm值受离子浓度的影响非常大，不同的qPCR盒子其成分可能不一样，就有可能造成熔解温度不同，这个原理你可以看看相关网页资料去，所以熔解曲线不是因为机器不同而不同，是因为qPCR的盒子不同而不同
赞一下 回复此楼
用心
6楼2013-10-17 12:30:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yesali 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学求调剂 +3 临泽境llllll 2026-03-17 4/200 2026-03-19 13:59 by houyaoxu
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +5 枫桥ZL 2026-03-18 6/300 2026-03-19 13:24 by 枫桥ZL
[考研] 一志愿中海洋材料工程专硕330分求调剂 +7 小材化本科 2026-03-18 7/350 2026-03-19 10:46 by Linda Hu
[考研] 一志愿985，本科211，0817化学工程与技术319求调剂 +10 Liwangman 2026-03-15 10/500 2026-03-19 10:25 by 无际的草原
[考研] 0703化学调剂，求各位老师收留 +10 秋有木北 2026-03-14 10/500 2026-03-19 05:52 by anny19840123
[考研] 化学工程321分求调剂 +15 大米饭！ 2026-03-15 18/900 2026-03-18 14:52 by haxia
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +5 梨花珞晚风 2026-03-17 5/250 2026-03-18 14:49 by haxia
[考研] 材料与化工一志愿南昌大学327求调剂推荐 +8 Ncdx123456 2026-03-13 9/450 2026-03-18 14:40 by haxia
[考研] 材料专硕274一志愿陕西师范大学求调剂 +6 薛云鹏 2026-03-13 6/300 2026-03-18 14:14 by 脱颖而出
[考研] 0703化学336分求调剂 +6 zbzihdhd 2026-03-15 7/350 2026-03-18 09:53 by zhukairuo
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
[考研] 301求调剂 +4 A_JiXing 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:32 by ruiyingmiao
[考研] 302求调剂 +4 小贾同学123 2026-03-15 8/400 2026-03-17 10:33 by 小贾同学123
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
[考研] [导师推荐]西南科技大学国防/材料导师推荐 +3 尖角小荷 2026-03-16 6/300 2026-03-16 23:21 by 尖角小荷
[考研] 东南大学364求调剂 +5 JasonYuiui 2026-03-15 5/250 2026-03-16 21:28 by 木瓜膏
[考研] 0856专硕279求调剂 +5 加油加油！? 2026-03-15 5/250 2026-03-15 11:58 by 2020015
[基金申请] 现在如何回避去年的某一个专家，不知道名字 +3 zk200107 2026-03-12 6/300 2026-03-14 17:13 by zk200107
[考研] 学硕285求调剂 +13 Wisjxn 2026-03-12 46/2300 2026-03-14 10:33 by JourneyLucky
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-13 3/150 2026-03-13 20:41 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭