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00811102

新虫 (初入文坛)

[求助] 好心人帮我分析分析融解曲线，不胜感激啊 已有2人参与

大家好，我最近在做定量PCR，想问一下这个溶解曲线是怎么回事？希望好心人帮我解决解决
好心人帮我分析分析融解曲线，不胜感激啊
IMG_20131228_175444.jpg
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1楼 2013-12-28 18:04:30
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Dr.G

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-28 20:53:10
从图上看有8组信号，3组有2个重复样本，2组只有1个样本；
右边4组的溶解曲线单峰，正常，Tm值在85度左右；
左边（长斜线的4组）4组信号，形状不正常，看上去像是65度已经超过了它的Tm值，这4组溶解曲线信号像是正常溶解曲线右半部分（单峰右边下降的那部分）；
请问1.你是用两个不同的模板（左边4组一种，右边4组一种）做的qPCR吗？（一般不会这么做）
    2.还是你用一种模板做了4组（最高浓度的1个样本，其他浓度的2个重复）？
如果是2，建议检查下仪器设置，感觉像是把前面PCR时采集的信号换算后反映在溶解曲线信号上了
只是猜测，请批评指正
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2楼2013-12-28 20:41:58
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-31 00:44:57
不要把原始的荧光-温度曲线与处理过的熔解峰显示在一张图上。
熔解曲线有两个峰值，但熔解温度比较接近，说明产物不单一。
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3楼2013-12-29 12:54:47
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阿凡的小开
感谢分享感谢分享感谢分享
4楼2013-12-30 19:21:53
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bloodwar

银虫 (小有名气)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-31 00:45:04
怎么融曲和标曲在一个界面啊，而且你的融曲对应的是什么样品液不清楚，感觉这个融曲的特异性不强
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5楼2013-12-30 22:16:08
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luyongchao

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by bloodwar at 2013-12-30 22:16:08
怎么融曲和标曲在一个界面啊，而且你的融曲对应的是什么样品液不清楚，感觉这个融曲的特异性不强

两个都是溶解曲线好吧
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6楼2013-12-31 09:34:41
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