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00811102

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 149.5
帖子: 5
在线: 5.4小时
虫号: 1823081
注册: 2012-05-17
专业: 发育生物学

[求助] 好心人帮我分析分析融解曲线，不胜感激啊已有2人参与

大家好，我最近在做定量PCR，想问一下这个溶解曲线是怎么回事？希望好心人帮我解决解决

IMG_20131228_175444.jpg

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1楼 2013-12-28 18:04:30

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阿凡的小开

感谢分享感谢分享感谢分享

4楼2013-12-30 19:21:53

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

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Dr.G

新虫 (初入文坛)

应助: 5 (幼儿园)
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帖子: 13
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虫号: 2872883
注册: 2013-12-15
专业: 生物大分子结构与功能

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-28 20:53:10

从图上看有8组信号，3组有2个重复样本，2组只有1个样本；
右边4组的溶解曲线单峰，正常，Tm值在85度左右；
左边（长斜线的4组）4组信号，形状不正常，看上去像是65度已经超过了它的Tm值，这4组溶解曲线信号像是正常溶解曲线右半部分（单峰右边下降的那部分）；
请问1.你是用两个不同的模板（左边4组一种，右边4组一种）做的qPCR吗？（一般不会这么做）
2.还是你用一种模板做了4组（最高浓度的1个样本，其他浓度的2个重复）？
如果是2，建议检查下仪器设置，感觉像是把前面PCR时采集的信号换算后反映在溶解曲线信号上了
只是猜测，请批评指正