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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » real-time PCR 相对定量时 找不到内参基因 是不是就没法做？
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匿名

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1楼 2013-10-12 10:36:18
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lmcyjxs

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验！ 2013-10-18 02:28:02
我最近也在学习，我认为如果你的物种无直接可用的内参，你应该从同源性较高的物种里找看家基因，然后考察看家基因在你物种里的稳定性等情况，进而确定是否合适。仅供参考，祝好
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思路决定出路。。。
2楼2013-10-17 21:17:15
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匿名

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3楼2013-10-17 21:40:11
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taccycle

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

还有个办法，你可以用总RNA量作为参照，其原理就是比较同样多的总RNA中目的基因的表达量，这样就不用内参基因了，但是你要把RNA做一下精确定量，这个方法也是被认可的。
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用心
4楼2013-10-18 17:01:17
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wanghh_lzu

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我实验选的在NCBI里面也查不到内参基因的信息；所以通过设计简并引物得到了部分序列，因为内参基因一般都普遍存在且表达量比较高的，所以很容易就扩出来了。之后再根据你得到的这些序列设计定量用的引物就可以了。加油！
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5楼2013-11-09 10:15:32
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