24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

mingming1990

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 316
散金: 30
帖子: 2
在线: 2.3小时
虫号: 2721348
注册: 2013-10-13
专业: 蛋白质组学

[求助] RT-PCR 2△△Ct法，阴性对照与目标基因PCR后产物的溶解曲线和跑胶条带几乎一样？已有1人参与

各位大神：
   第一次发帖，十分紧急！麻烦帮忙回答一下以下问题：
   个人做RT-PCR 荧光实时相对定量，用的是 2△△Ct法，但是阴性对照NTC与加了模板的目标基因PCR后产物的溶解曲线和跑胶条带几乎一样！
   而且：①目标基因与NTC的Ct值仅相差不到5；②NTC的溶解曲线起峰单一且高度与目标基因相近；③琼脂糖跑胶结果，两者条带亮度与位置也几乎相同。
   个人使用的是一次性无菌枪头，勤换PE手套，操作台为超净台，PCR扩增体系也更换过，今天还重新订了引物重新稀释（以防引物已被污染），但情况没有好转。
   有人说可能是污染，让我订滤芯枪头看情况是否好转。请问，污染可能只污染目标基因么？因为我的目标基因P有这个问题，但是管家基因G就没有这个问题，都是一个板子做出来的。
   具体情况在图上，希望各位大神多多提意见！谢谢！

1.png

RT-PCR 2△△Ct法，阴性对照与目标基因PCR后产物的溶解曲线和跑胶条带几乎一样？-1

2.png

RT-PCR 2△△Ct法，阴性对照与目标基因PCR后产物的溶解曲线和跑胶条带几乎一样？-2

3.png

回复此楼

» 猜你喜欢

胶体几丁质的结晶度？已经有0人回复
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士已经有2人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有178人回复
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线已经有5人回复
推荐一些基础有机化学的实验教程已经有0人回复
探秘高分子世界：链动微观，筑就材料新篇已经有0人回复
科研赋能时尚宠物：检测护航，焕新养宠体验已经有0人回复
精测粗蛋白：以科研标尺，守品质核心已经有0人回复
解码碳水世界：科研探秘，赋能营养与应用已经有0人回复
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石已经有0人回复
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例已经有0人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

荧光定量PCR 扩增曲线求助已经有24人回复
RT-PCR过程中内参基因CT值问题已经有6人回复
如何用western或RT-PCR判断细胞NF-KB组成型表达，阴性/阳性对照需要吗，是什么？已经有3人回复
[求助]PCR后跑胶结果如图，请大家帮忙分析一下，谢谢各位已经有4人回复
做荧光定量PCR,如果对照组的目的基因不表达,在采用2-△△Ct时怎么处理数据已经有6人回复
定量PCR-引物二聚体问题已经有5人回复
荧光定量溶解曲线怎么回事？已经有11人回复
使用多对引物进行实时定量PCR后未得到实验结果，是否能说明目的基因不表达？已经有10人回复
QPCR 溶解曲线已经有9人回复
新手求助PCR产物Blast问题，先谢谢大家了已经有11人回复
real-time PCR相对定量2 -△△CT法中用来判断扩增效率的标准曲线怎么制作？已经有8人回复
PCR 溶解曲线乱、ct值高怎么办已经有12人回复
PCR空白跑出了与目的基因一样的一条浅带已经有16人回复
real time PCR 溶解曲线目的产物后又出一个峰怎么回事已经有5人回复
试剂盒提取细菌DNA后，跑胶检测有条带，但是PCR后却无扩增产物。已经有10人回复
SYBR荧光定量的溶解曲线已经有10人回复
求解：实时荧光定量PCR奇峰已经有18人回复
rt-pcr图，请大神们帮助分析一下，急。。。谢谢。。。已经有20人回复
急求RT-PCR电泳图分析已经有22人回复
PCR产物跑胶跑不动，什么原因？已经有10人回复
RT-PCR扩增图和溶解曲线跑成这样已经有12人回复
PCR产物回收之后跑胶浓度过低已经有17人回复
反转录后PCR无条带已经有5人回复
荧光定量PCR(相对定量)的分析结果2-△△Ct怎么看呀? 已经有31人回复
【求助/交流】做培养细胞的RT-PCR，β-actin内参出现两个条带，求原因。已经有10人回复
【分享】realtime pcr 个人经验分享已经有41人回复

1楼2014-07-22 20:50:57

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

相关版块跳转我要订阅楼主 mingming1990 的主题更新

返回列表