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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 质粒 提取 和 双酶切
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永峰1230

铜虫 (小有名气)

[求助] 质粒 提取 和 双酶切 已有1人参与

质粒提取 的  时候：  碱法提取----加入 乙醇干燥后 总是看不到 加入乙醇前的 白色 质粒 DNA 沉淀  。然后加入 TE  rna 酶，   跑电泳  还是有  质粒条带的。。

然后酶切 ，不论是 双酶切还是 单酶切  ， 时间  1小时，，过夜  都是 弥散状。   这是由于 质粒提取 不好的原因吗？   

质粒 提取  和 双酶切
质粒提取.jpg


质粒 提取  和 双酶切-1
质粒 酶切 .jpg
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12
1楼 2014-06-23 15:45:55
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永峰1230

铜虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-06-23 17:11:38
那就是质粒提取问题了，建议你换方法试试，用溶菌酶提取一次试试...

谢谢你，，确实 质粒提取的 问题，，
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12
5楼2014-06-24 21:54:38
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-06-23 17:26:28
弥散的原因有很多，我觉得你这个是酶切条件的问题，双酶切我们一般是37℃2h，建议好好看下酶的说明书，然后再做。
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人生贵在行动，迟疑不决时，不妨先迈出小小一步。
2楼2014-06-23 16:19:42
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永峰1230

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-06-23 16:19:42
弥散的原因有很多，我觉得你这个是酶切条件的问题，双酶切我们一般是37℃2h，建议好好看下酶的说明书，然后再做。

我做过 1小时 ，3小时 ，过夜的  。。都是这个样子。
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12
3楼2014-06-23 17:09:10
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人
引用回帖:
3楼: Originally posted by 永峰1230 at 2014-06-23 17:09:10
我做过 1小时 ，3小时 ，过夜的  。。都是这个样子。...

那就是质粒提取问题了，建议你换方法试试，用溶菌酶提取一次试试
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永峰1230
人生贵在行动，迟疑不决时，不妨先迈出小小一步。
4楼2014-06-23 17:11:38
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