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永峰1230

铜虫 (小有名气)

[求助] 质粒 提取 和 双酶切 已有1人参与

质粒提取 的  时候:  碱法提取----加入 乙醇干燥后 总是看不到 加入乙醇前的 白色 质粒 DNA 沉淀  。然后加入 TE  rna 酶,   跑电泳  还是有  质粒条带的。。

然后酶切 ,不论是 双酶切还是 单酶切  , 时间  1小时,,过夜  都是 弥散状。   这是由于 质粒提取 不好的原因吗?   

质粒 提取  和 双酶切
质粒提取.jpg


质粒 提取  和 双酶切-1
质粒 酶切 .jpg
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

引用回帖:
3楼: Originally posted by 永峰1230 at 2014-06-23 17:09:10
我做过 1小时 ,3小时 ,过夜的  。。都是这个样子。...

那就是质粒提取问题了,建议你换方法试试,用溶菌酶提取一次试试

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人生贵在行动,迟疑不决时,不妨先迈出小小一步。
4楼2014-06-23 17:11:38
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-06-23 17:26:28
弥散的原因有很多,我觉得你这个是酶切条件的问题,双酶切我们一般是37℃2h,建议好好看下酶的说明书,然后再做。
人生贵在行动,迟疑不决时,不妨先迈出小小一步。
2楼2014-06-23 16:19:42
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永峰1230

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-06-23 16:19:42
弥散的原因有很多,我觉得你这个是酶切条件的问题,双酶切我们一般是37℃2h,建议好好看下酶的说明书,然后再做。

我做过 1小时 ,3小时 ,过夜的  。。都是这个样子。
12
3楼2014-06-23 17:09:10
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

永峰1230

铜虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-06-23 17:11:38
那就是质粒提取问题了,建议你换方法试试,用溶菌酶提取一次试试...

谢谢你,,确实 质粒提取的 问题,,
12
5楼2014-06-24 21:54:38
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