应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 质粒酶切后没有任何条带是什么原因
71/1返回列表
查看: 10606  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

dxl727

新虫 (初入文坛)

[求助] 质粒酶切后没有任何条带是什么原因 已有1人参与

我提取质粒跑胶，大小应该是对的，做酶切验证，用的AscⅠ这个酶，可以把我的质粒切成3个片段，酶切1h，3h，12h都没有任何条带，用这个酶同时酶切我的另一个质粒，都很正常，而且我每次都用没有酶切的质粒和酶切的质粒同时跑胶，没有酶切的质粒有条带，酶切之后就什么都没有了，然后我又换了其他的酶（有该酶的酶切位点）做了酶切，结果也是什么条带都没有，质粒我重新提取之后做酶切结果也是一样，请大家帮我分析一下是什么原因，谢谢。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-05-20 21:31:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

meng_xu

铜虫 (小有名气)
有图么？
回复此楼
2楼2014-05-21 06:13:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dxl727

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by meng_xu at 2014-05-21 06:13:02
有图么？

你好，有图的。
第1个和第8个泳道为marker，第2个为入门质粒，第3,4,5泳道为入门质粒酶切产物，第6泳道为目的质粒酶切结果，什么带都没有，第7泳道为目的质粒稀释10倍后的跑胶结果。目的质粒用的是AscⅠ这个酶，第4泳道为AscⅠ酶切入门质粒的结果，很正常啊，所以证明酶没有问题啊。
质粒酶切后没有任何条带是什么原因
两个质粒酶切图5-17-1.jpg
赞一下 回复此楼
3楼2014-05-21 10:51:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

meng_xu

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★
dxl727(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-06-13 16:35:12
引用回帖:
3楼: Originally posted by dxl727 at 2014-05-21 10:51:34
你好，有图的。
第1个和第8个泳道为marker，第2个为入门质粒，第3,4,5泳道为入门质粒酶切产物，第6泳道为目的质粒酶切结果，什么带都没有，第7泳道为目的质粒稀释10倍后的跑胶结果。目的质粒用的是AscⅠ这个酶，第 ...

从你的描述和这个结果图，我猜测可能是你目的质粒的问题，你重新提取的质粒，有测浓度么？多少？然后280 260的比值是多少？我感觉可能是你的质粒提取失败。

虽然条带很亮，但是看起来并不像是质粒的。你也可以用你的目的质粒做个转化验证一下。根据转化的结果，大致可以判断出你质粒的浓度。

我建议你重新提取质粒，或者重新做连接，转化，再提取新的质粒，验证。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

dxl727
4楼2014-05-23 05:43:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dxl727

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by meng_xu at 2014-05-23 05:43:43
从你的描述和这个结果图，我猜测可能是你目的质粒的问题，你重新提取的质粒，有测浓度么？多少？然后280 260的比值是多少？我感觉可能是你的质粒提取失败。

虽然条带很亮，但是看起来并不像是质粒的。你也可以用 ...

我也怀疑是质粒有问题，我再重新转化一次看看，谢谢啦
赞一下 回复此楼
5楼2014-05-23 14:00:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

永峰1230

铜虫 (小有名气)
请问，，碱法提取 质粒后 可以 直接 酶切吗？  还需要什么 操作步骤吗？？谢谢
赞一下 回复此楼
12
6楼2014-06-13 15:05:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

初。。来乍到

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by 永峰1230 at 2014-06-13 15:05:00
请问，，碱法提取 质粒后 可以 直接 酶切吗？  还需要什么 操作步骤吗？？谢谢

碱法提取质粒，跑胶检测后要是质粒没问题就可以酶切了的，没有什么别的步骤了
赞一下 回复此楼
7楼2014-07-04 18:52:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 dxl727 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 4FFAWE8HcgUD 2026-08-29 5/250 2026-08-30 20:41 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 4FFAWE8HcgUD 2026-08-29 4/200 2026-08-30 20:30 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 AVl0JAsg9hyo 2026-08-29 5/250 2026-08-30 19:57 by hZiFeudZyoGR
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 6/300 2026-08-30 19:13 by hZiFeudZyoGR
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 4/200 2026-08-30 19:13 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 5/250 2026-08-30 18:40 by hZiFeudZyoGR
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 18:20 by hZiFeudZyoGR
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-30 17:56 by hZiFeudZyoGR
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 17:47 by hZiFeudZyoGR
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-30 17:25 by hZiFeudZyoGR
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 7/350 2026-08-30 11:51 by l0VvVHGBGRLv
[基金申请] 29号明天会评吗 +3 笨笨唐 2026-08-28 3/150 2026-08-30 09:29 by cww8181
[教师之家] 导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！ +9 苏东坡二世 2026-08-23 9/450 2026-08-29 14:41 by hustersqt
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 基金不中，共勉 +11 eulota 2026-08-26 11/550 2026-08-28 14:22 by 火星超人xi
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭