| 查看: 3936 | 回复: 20 | ||
wxl.1989822金虫 (小有名气)
|
[求助]
重组质粒双酶切后没有条带 已有2人参与
|
|
| RT 本人最近做的一个载体构建，重组质粒验证的时候提取质粒双酶切，空质粒和酶切的一起跑胶显示重组质粒大致正确，酶切的泳道没有条带，进行菌液和重组质粒PCR目的基因显示，能P出目的基因？请教这是怎么回事？ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有54人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助，酶切之后，非但是没有产物，而且连原本的质粒也没跑出来
已经有6人回复
- 重组质粒双酶切
已经有7人回复
- 大神救命！！！菌液PCR 出来酶切质粒没有目的条带
已经有5人回复
- 重组质粒酶切验证没有目的条带
已经有7人回复
- 提取重组质粒进行双酶切之后什么条带也没有，怎么回事？？
已经有7人回复
- 酶切后没条带了
已经有5人回复
- 重组质粒单双酶切结果一样，奇怪了的……
已经有15人回复
- 空质粒双酶切后大小不对，纠结！
已经有11人回复
- 质粒双酶切。。。。。。。
已经有5人回复
- 双酶切没有切开，怎么回事啊
已经有6人回复
- 做双酶切 跑胶后什么都没有 是怎么回事？
已经有19人回复
- 双酶切后目的条带的疑问？
已经有8人回复
- 求助关于双酶切空载跑胶没有条带！
已经有15人回复
- 提取的质粒跑出四条或者五条带，但酶切后只有一条带，是不是我的质粒污染了
已经有18人回复
- 十万火急，重组质粒酶切只有一条带，测序有结果，但反复说我质粒浓度很低
已经有16人回复
- 酶切的时候，条带成糊状，一片。
已经有7人回复
- 质粒双酶切问题
已经有16人回复
- 双酶切切出了5条条带
已经有9人回复
- 【求助/交流】双酶切电泳条带拖尾严重，什么原因啊？
已经有9人回复
- 【求助/交流】求助、质粒酶切没有条带？
已经有18人回复
- 【求助/交流】酶切后无任何条带是什么原因？
已经有8人回复
- 双酶切后目的条带下出现多个条带的原因
已经有9人回复
- 【求助/交流】双酶切质粒后，目的条带浅且前方有模糊亮带
已经有12人回复
鬼羽帝魂
木虫 (著名写手)
- 应助: 183 (高中生)
- 金币: 3100.2
- 散金: 19
- 红花: 12
- 帖子: 1427
- 在线: 186.8小时
- 虫号: 2538789
- 注册: 2013-07-09
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
2楼2014-03-06 21:22:02
鬼羽帝魂
木虫 (著名写手)
- 应助: 183 (高中生)
- 金币: 3100.2
- 散金: 19
- 红花: 12
- 帖子: 1427
- 在线: 186.8小时
- 虫号: 2538789
- 注册: 2013-07-09
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
3楼2014-03-06 21:22:41
西门吹雪170
荣誉版主 (职业作家)
- MolEPI: 1
- 应助: 92 (初中生)
- 贵宾: 0.982
- 金币: 27278.4
- 散金: 1072
- 红花: 40
- 沙发: 2
- 帖子: 3092
- 在线: 438.7小时
- 虫号: 1209807
- 注册: 2011-02-22
- 性别: MM
- 专业: 认知科学
- 管辖: 分子生物
4楼2014-03-06 21:31:42
鬼羽帝魂
木虫 (著名写手)
- 应助: 183 (高中生)
- 金币: 3100.2
- 散金: 19
- 红花: 12
- 帖子: 1427
- 在线: 186.8小时
- 虫号: 2538789
- 注册: 2013-07-09
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
5楼2014-03-06 21:40:15
西门吹雪170
荣誉版主 (职业作家)
- MolEPI: 1
- 应助: 92 (初中生)
- 贵宾: 0.982
- 金币: 27278.4
- 散金: 1072
- 红花: 40
- 沙发: 2
- 帖子: 3092
- 在线: 438.7小时
- 虫号: 1209807
- 注册: 2011-02-22
- 性别: MM
- 专业: 认知科学
- 管辖: 分子生物
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wxl.1989822: 金币+5, ★有帮助 2014-03-06 22:05:02
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-03-07 18:37:50
wxl.1989822: 金币+5, ★有帮助 2014-03-08 13:46:26
感谢参与，应助指数 +1
wxl.1989822: 金币+5, ★有帮助 2014-03-06 22:05:02
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-03-07 18:37:50
wxl.1989822: 金币+5, ★有帮助 2014-03-08 13:46:26
| 这也是经常遇到的问题，重组质粒大小正确，进行PCR验证也有出现目的条带，但是就是酶切不出条带，建议你测一下重组质粒的浓度，然后按最终反应体系质粒的浓度约为20ug/uL进行计算所需加样的量，试试看吧，一般这样是可以切出来的，37℃ 2.5h |
6楼2014-03-06 21:42:46
西门吹雪170
荣誉版主 (职业作家)
- MolEPI: 1
- 应助: 92 (初中生)
- 贵宾: 0.982
- 金币: 27278.4
- 散金: 1072
- 红花: 40
- 沙发: 2
- 帖子: 3092
- 在线: 438.7小时
- 虫号: 1209807
- 注册: 2011-02-22
- 性别: MM
- 专业: 认知科学
- 管辖: 分子生物
7楼2014-03-06 21:52:33
lvbobo823
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 363 (硕士)
- 金币: 7753.3
- 散金: 15
- 红花: 9
- 帖子: 751
- 在线: 189.4小时
- 虫号: 819723
- 注册: 2009-07-31
- 性别: GG
- 专业: 植物遗传学
8楼2014-03-06 22:02:09
wxl.1989822
金虫 (小有名气)
- 应助: 13 (小学生)
- 金币: 445.9
- 红花: 15
- 帖子: 134
- 在线: 63.9小时
- 虫号: 2103782
- 注册: 2012-11-03
- 性别: GG
- 专业: 免疫生物学
9楼2014-03-06 22:04:23
鬼羽帝魂
木虫 (著名写手)
- 应助: 183 (高中生)
- 金币: 3100.2
- 散金: 19
- 红花: 12
- 帖子: 1427
- 在线: 186.8小时
- 虫号: 2538789
- 注册: 2013-07-09
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
10楼2014-03-07 08:57:16
