应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 质粒和目的片段
161/2返回列表12下一页
查看: 2147  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

潇潇杨雨125

银虫 (小有名气)

[求助] 质粒和目的片段 已有6人参与

将T载体与目的片段连接后，做阳性克隆有目的片段，但是将连接体用质粒提取试剂盒提取后，再跑电泳时，为什么最亮的条带介于T载体和目的片段之间？？不应该是载体和目的片段之和吗？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-05-06 08:20:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

潇潇杨雨125

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 朱多龙 at 2014-05-06 09:50:43
直接酶切后电泳就好了吗，干嘛那么纠结。也不知道你的目的片段是多大啊。你说的情况很正常，有时候提出的载体上会被蛋白吸附又或者质粒的构型发生改变导致直接跑胶看不出来啊。有时间就没切好了。...

关键是我的是兼并引物，没有酶切位点啊！

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

潇潇杨雨125
6楼2014-05-06 10:59:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你确定你的目的片段克隆在载体里面了吗？你可以粗提一下质粒，然后用兼并引物验证是否有目的片段插入，有的话再用试剂盒精提跑电泳，顺便把粗提的质粒也点上
赞一下(1人) 回复此楼
植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
7楼2014-05-06 12:26:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

飞飞fly

银虫 (正式写手)
飘过

[ 发自小木虫客户端 ]
回复此楼
2楼2014-05-06 08:21:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HYZ221314

至尊木虫 (职业作家)

优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
DNA跑电泳和体积、长度有关系，可能是你所说的条带卷缩了导致比T载体短比目的长也或者提质粒过程中打断了，但这不可能？

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
青山不断，绿水长流
3楼2014-05-06 08:27:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

朱多龙

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by HYZ221314 at 2014-05-06 08:27:35
DNA跑电泳和体积、长度有关系，可能是你所说的条带卷缩了导致比T载体短比目的长也或者提质粒过程中打断了，但这不可能？

直接酶切后电泳就好了吗，干嘛那么纠结。也不知道你的目的片段是多大啊。你说的情况很正常，有时候提出的载体上会被蛋白吸附又或者质粒的构型发生改变导致直接跑胶看不出来啊。有时间就没切好了。
赞一下 回复此楼
4楼2014-05-06 09:50:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HYZ221314

至尊木虫 (职业作家)

优秀版主
引用回帖:
4楼: Originally posted by 朱多龙 at 2014-05-06 09:50:43
直接酶切后电泳就好了吗，干嘛那么纠结。也不知道你的目的片段是多大啊。你说的情况很正常，有时候提出的载体上会被蛋白吸附又或者质粒的构型发生改变导致直接跑胶看不出来啊。有时间就没切好了。...

嗯，说的很在理！
回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

潇潇杨雨125
青山不断，绿水长流
5楼2014-05-06 09:54:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

朱多龙

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by 潇潇杨雨125 at 2014-05-06 10:59:11
关键是我的是兼并引物，没有酶切位点啊！
...

你不是连得T载体吗？？  T载体上不是有好多酶切位点。
赞一下 回复此楼
8楼2014-05-06 14:26:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

潇潇杨雨125

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 飞飞fly at 2014-05-06 08:21:02
飘过

是不是因为T
载体是线性的？？

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
9楼2014-05-06 17:09:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

潇潇杨雨125

银虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 朱多龙 at 2014-05-06 14:26:33
你不是连得T载体吗？？  T载体上不是有好多酶切位点。...

用T载体上的酶来切吗？

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
10楼2014-05-06 17:10:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 潇潇杨雨125 的主题更新
161/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 环境领域全国重点实验室招收博士1-2名 +3 QGZDSYS 2026-03-13 3/150 2026-03-18 00:13 by PY-Hzb
[考研] 考研求调剂 +3 橘颂. 2026-03-17 4/200 2026-03-17 21:43 by 有只狸奴
[考研] 材料，纺织，生物（0856、0710），化学招生啦 +3 Eember. 2026-03-17 7/350 2026-03-17 20:20 by 花125533
[考研] 304求调剂 +8 小熊joy 2026-03-14 8/400 2026-03-17 17:29 by ruiyingmiao
[考研] 材料工程专硕调剂 +5 204818@lcx 2026-03-17 5/250 2026-03-17 17:27 by Little-xue
[考研] 考研化学学硕调剂，一志愿985 +4 张vvvv 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:15 by ruiyingmiao
[考研] 26考研求调剂 +6 丶宏Sir 2026-03-13 6/300 2026-03-17 16:13 by 醉在风里
[考研] 东南大学364求调剂 +5 JasonYuiui 2026-03-15 5/250 2026-03-16 21:28 by 木瓜膏
[考研] 289求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-14 6/300 2026-03-14 18:58 by userper
[考研] 297一志愿上交085600求调剂 +5 指尖八千里 2026-03-14 5/250 2026-03-14 17:26 by a不易
[考研] 复试调剂 +3 呼呼？~+123456 2026-03-14 3/150 2026-03-14 16:53 by WTUChen
[考研] 330求调剂 +3 ?酱给调剂跪了 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:13 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +6 邱gl 2026-03-12 7/350 2026-03-13 23:24 by 邱gl
[考研] 0703，333分求调剂 一志愿郑州大学-物理化学 +3 李魔女斗篷 2026-03-11 3/150 2026-03-13 22:24 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +5 是Lupa啊 2026-03-11 5/250 2026-03-13 22:13 by JourneyLucky
[考研] （081700）化学工程与技术-298分求调剂 +12 11啦啦啦 2026-03-11 35/1750 2026-03-13 21:25 by JourneyLucky
[论文投稿] 投稿问题 5+4 星光灿烂xt 2026-03-12 6/300 2026-03-13 14:17 by god_tian
[考研] 0817化学工程与技术考研312分调剂 +3 T123 tt 2026-03-12 3/150 2026-03-13 10:49 by houyaoxu
[考研] 290求调剂 +3 ADT 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:19 by peike
[考研] 283求调剂，材料、化工皆可 +8 苏打水7777 2026-03-11 10/500 2026-03-13 09:06 by Linda Hu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭