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1楼2014-04-15 17:57:44

柠檬可乐星

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引用回帖:

8楼: Originally posted by 不爱做实验 at 2014-04-15 22:07:59
就是把片段作为模版，加0.5-1ul 进行和其他同等条件的PCR扩增。。。
正对照是检验你有没有将目的片段回收回来以及PCR条件是否合适。。。...

您这里说的“片段”是胶回收的产物吧？

越努力越幸运

9楼2014-04-16 20:50:18

查看全部 17 个回答

Neo2000

木虫 (著名写手)

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【答案】应助回帖

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是不是退火温度低了？

[ 发自小木虫客户端 ]

2楼2014-04-15 18:21:56

不爱做实验

银虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

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gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-04-15 20:50:34

非特异性片段，有时提高退火温度会有作用。。。
还有，可能污染杂菌。。。
另外，需要正对照，这样可以比较。。。

3楼2014-04-15 18:35:15

David勇

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【答案】应助回帖

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gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-04-15 20:50:40

用的引物是通用引物吗？是不是挑克隆的时候无然杂菌，或者不是单克隆，有很多原因的，退火温度也可以高点试下。以前有没有做出过没有杂带的情况？

4楼2014-04-15 19:56:52