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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

[求助] tail pcr条带弥散 已有2人参与

用takara的genome walking试剂盒扩增侧翼序列,感觉嵌套引物没有什么问题,但就是扩出来的条带是弥散的,3rd的条带还不如2nd,有没有人做过帮忙分析下原因?

tail pcr条带弥散
fyt 2014-03-27 23hr 03min.jpg
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 三蛰 at 2014-03-28 14:42:46
首先,我觉得你的胶有问题。这不算弥散吧,出现这种现象可能是电压过高或者胶不均匀。另外,做tail,这个结果很不错呀,选择合适的测序吧。

这个结果可以吗?我第一次做,不会从里面选合适的条带啊,感觉都不怎么样
3楼2014-03-28 14:55:46
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三蛰

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-03-28 16:24:01
首先,我觉得你的胶有问题。这不算弥散吧,出现这种现象可能是电压过高或者胶不均匀。另外,做tail,这个结果很不错呀,选择合适的测序吧。
我不会!
2楼2014-03-28 14:42:46
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三蛰

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


夏天的普洱茶(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-12 17:14:03
我觉得你得做个好点的胶,然后你要明确你的目的DNA是多大,根据这个来选取几个切胶回收,然后转化测序。我也只做过一次。
我不会!
4楼2014-03-28 16:43:31
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 三蛰 at 2014-03-28 16:43:31
我觉得你得做个好点的胶,然后你要明确你的目的DNA是多大,根据这个来选取几个切胶回收,然后转化测序。我也只做过一次。

我的DNA多大我不清楚啊,是未知的,现在P出来一个片段,想通过TAIL PCR扩得全长,我不知道该选择哪一个片段回收,我看说明书上,人家最后一轮的条带很单一的
5楼2014-03-28 16:49:24
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