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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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怎么都行

银虫 (小有名气)

[求助] 二次PCR产物弥散

第一轮PCR 产物微弱(上图),第二轮PCR用第一轮的产物做模板,无论模板稀释多少倍,怎么调整引物浓度和退火温度,结果都是如下图般——一片弥散带。求助高手这该怎么办呢?郁闷中。



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怎么都行

银虫 (小有名气)

自顶求助
2楼2011-11-14 14:31:01
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jeffzm

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): 有可能! 2011-11-14 16:19:26
我觉得可能,也许,染胶的时候是不是有其它DNA污染,胶回收的时候回收的不纯。
3楼2011-11-14 15:12:19
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longrna

新虫 (正式写手)

遇到过同样的情况,还迷散的更厉害都有。。。。
伟大航线....
4楼2011-11-14 16:20:16
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shuangzi8761

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

占个位子 坐等答案 我也觉得奇怪 另外楼主为何要做二次PCR?
5楼2011-11-14 20:56:37
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怎么都行

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by shuangzi8761 at 2011-11-14 20:56:37:
占个位子 坐等答案 我也觉得奇怪 另外楼主为何要做二次PCR?

第一轮产物量太少,所以再次扩增
6楼2011-11-15 21:53:46
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healerly

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

7楼2011-11-16 10:05:15
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sthink

铜虫 (初入文坛)

我最经也碰到这样的问题,快一个星期了,还没弄到
8楼2012-02-10 23:03:07
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fwks3518

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
wanhscn(金币+3): 谢谢应助回帖! 2012-02-11 13:12:51
怎么都行(金币+10): ★★★很有帮助 2012-02-11 18:59:47
这几天我也遇到二次PCR怎么扩增也不出的情况了,我查了一下网上的建议,总结为两种:
1  巢式PCR: 重新设计引物,比原先扩增的片段更长一些,然后再用原先的引物来扩增
2  不要再试图二次PCR了,如果觉得第一次PCR量少,那就平行多扩增几批,以此来积累PCR产物量。
9楼2012-02-11 09:30:19
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rhguo

铜虫 (小有名气)

也不知道什么情况
10楼2012-02-26 09:03:07
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