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二次PCR产物弥散
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二次PCR产物弥散
第一轮PCR 产物微弱(上图),第二轮PCR用第一轮的产物做模板,无论模板稀释多少倍,怎么调整引物浓度和退火温度,结果都是如下图般——一片弥散带。求助高手这该怎么办呢?郁闷中。
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2011-11-10 14:11:15
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2011-11-14 14:31:01
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jeffzm
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★ ★
wanhscn(金币+2): 有可能! 2011-11-14 16:19:26
我觉得可能,也许,染胶的时候是不是有其它DNA污染,胶回收的时候回收的不纯。
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3楼
2011-11-14 15:12:19
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longrna
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遇到过同样的情况,还迷散的更厉害都有。。。。
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伟大航线....
4楼
2011-11-14 16:20:16
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shuangzi8761
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【答案】应助回帖
占个位子 坐等答案 我也觉得奇怪 另外楼主为何要做二次PCR?
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5楼
2011-11-14 20:56:37
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5楼
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Originally posted by
shuangzi8761
at 2011-11-14 20:56:37:
占个位子 坐等答案 我也觉得奇怪 另外楼主为何要做二次PCR?
第一轮产物量太少,所以再次扩增
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6楼
2011-11-15 21:53:46
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healerly
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7楼
2011-11-16 10:05:15
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sthink
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我最经也碰到这样的问题,快一个星期了,还没弄到
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8楼
2012-02-10 23:03:07
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fwks3518
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【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
wanhscn(金币+3): 谢谢应助回帖! 2012-02-11 13:12:51
怎么都行(金币+10):
★★★
很有帮助 2012-02-11 18:59:47
这几天我也遇到二次PCR怎么扩增也不出的情况了,我查了一下网上的建议,总结为两种:
1 巢式PCR: 重新设计引物,比原先扩增的片段更长一些,然后再用原先的引物来扩增
2 不要再试图二次PCR了,如果觉得第一次PCR量少,那就平行多扩增几批,以此来积累PCR产物量。
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9楼
2012-02-11 09:30:19
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rhguo
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也不知道什么情况
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10楼
2012-02-26 09:03:07
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