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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » tail pcr 第一轮老是弥散。。。
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sunney729

禁虫 (小有名气)
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1楼 2012-05-22 14:44:02
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lishuiqing

铜虫 (初入文坛)
你说的弥散是怎么一回事？
是PCR跑出来后 ，进行电泳弥散还是？
是点样的时候在点样孔弥散还是电泳跑出来弥散》？
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2楼2012-05-25 20:47:11
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lishuiqing

铜虫 (初入文坛)
★ ★
西瓜: 金币+2, 鼓励交流 2012-05-26 10:53:43
PCR程序是根据引物计算的，不能参照XXX的。（主要是退火温度）
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2012-05-25 20:48:33
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sunney729

禁虫 (小有名气)
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4楼2012-05-26 20:27:44
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sunney729

禁虫 (小有名气)
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5楼2012-05-26 20:27:58
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

第一轮弥散正常，第二轮跑出来了吗？
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jiayoubashaonian
6楼2012-05-26 21:22:17
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sunney729

禁虫 (小有名气)
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7楼2012-05-27 10:33:22
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
sunney729: 金币+5, ★★★很有帮助, 嗯，谢谢！ 2012-05-28 08:59:41
引用回帖:
7楼: Originally posted by sunney729 at 2012-05-27 10:33:22
没有跑出来。
不过之前我用普通的TAQ酶做第二轮，三种AD都加进去的时候，就跑出来了。

这是怎么回事呢？谢谢你。...

TAIL PCR这个东西重复出来很难，第二三轮有特异带就抓紧时间回收回来，片段太小了就不要收了，除去载体序列后，可用的序列在NCBI上Blast出来不特异，楼主可以试一下2007年的HIGH efficiency TAIL PCR，祝顺利！
赞一下(1人) 回复此楼
jiayoubashaonian
8楼2012-05-27 12:37:44
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lishuiqing

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by sunney729 at 2012-05-27 10:33:22
没有跑出来。
不过之前我用普通的TAQ酶做第二轮，三种AD都加进去的时候，就跑出来了。

这是怎么回事呢？谢谢你。...

那和PCR 没关系了。
电泳弥散，要么胶有问题，要么电压，缓冲体系有问题
赞一下 回复此楼
9楼2012-05-28 08:45:28
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