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dingcong1216

新虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
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专业: 生物大分子结构与功能

[求助] 电泳图引物条带很亮，目的产物条带不亮已有6人参与

PCR后跑电泳发现引物条带很亮，目的产物条带不亮。PCR程序为
   94℃  5min
   94℃  40S
   52℃  40S
   72℃  40S 38循环
   72℃ 10min
   4℃
电泳120v 35min
最右边的两个是我的，右二为不加cDNA的对照，右一是加了模板的图。
请各位大侠给点儿建议，怎样优化一下条件

电泳图引物条带很亮，目的产物条带不亮

dell 2014-03-26 11 时 50 分.jpg

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1楼 2014-03-26 16:10:34

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cm8002

金虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
dingcong1216(gyesang代发): 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2014-03-31 20:23:24

如上所说，提高退火温度；缩短退火时间；减少循环次数；延伸时间也可以相应缩短，一般的酶延伸速度1000bp/min

6楼2014-03-30 23:11:21

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