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pcr程序问题
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webrother
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pcr程序问题
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68摄氏度 30~60sec/Kb
68摄氏度 7min(彻底延伸) 这两步有什么联系?而且我的片段是8K。
Camera_20140221_110901.jpg
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2014-02-21 11:17:24
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2楼
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西门吹雪170
at 2014-02-21 12:36:01
68℃延伸吗?还是请楼主把整个PCR的程序列出来吧
我的目的片段是8k,程序如下:
94 1min
94 10s
68 8min
68 7min
4 -----
2到3循环 35个
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6楼
2014-02-21 14:30:37
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68℃延伸吗?还是请楼主把整个PCR的程序列出来吧
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植根于内心的修养;无需提醒的自觉;以约束为前提的自由;为别人着想的善良
2楼
2014-02-21 12:36:01
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网速有点问题,现在看见了图片。。。前面的是每个循环里面的延伸时间,后者相当于最后的延伸,保证彻底的扩增吧
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3楼
2014-02-21 12:39:47
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3楼
:
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西门吹雪170
at 2014-02-21 12:39:47
网速有点问题,现在看见了图片。。。前面的是每个循环里面的延伸时间,后者相当于最后的延伸,保证彻底的扩增吧
两步法快速PCR反应程序啊。前面的68度(变性退火合一)是对你目的片段的初步延伸,后面的68度再次延伸7min中是为了保证反应体系中未得到延伸完全的片段充分延伸啊。
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4楼
2014-02-21 12:54:52
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