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webrother

银虫 (小有名气)

[求助] pcr程序问题 已有5人参与

68摄氏度  30~60sec/Kb
68摄氏度  7min(彻底延伸)  这两步有什么联系?而且我的片段是8K。
pcr程序问题
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发扬钉子精神
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朱多龙

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-02-21 12:39:47
网速有点问题,现在看见了图片。。。前面的是每个循环里面的延伸时间,后者相当于最后的延伸,保证彻底的扩增吧

两步法快速PCR反应程序啊。前面的68度(变性退火合一)是对你目的片段的初步延伸,后面的68度再次延伸7min中是为了保证反应体系中未得到延伸完全的片段充分延伸啊。
4楼2014-02-21 12:54:52
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

68℃延伸吗?还是请楼主把整个PCR的程序列出来吧
植根于内心的修养;无需提醒的自觉;以约束为前提的自由;为别人着想的善良
2楼2014-02-21 12:36:01
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
网速有点问题,现在看见了图片。。。前面的是每个循环里面的延伸时间,后者相当于最后的延伸,保证彻底的扩增吧
植根于内心的修养;无需提醒的自觉;以约束为前提的自由;为别人着想的善良
3楼2014-02-21 12:39:47
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 朱多龙 at 2014-02-21 12:54:52
两步法快速PCR反应程序啊。前面的68度(变性退火合一)是对你目的片段的初步延伸,后面的68度再次延伸7min中是为了保证反应体系中未得到延伸完全的片段充分延伸啊。...

很专业的回答,谢谢,学习了
植根于内心的修养;无需提醒的自觉;以约束为前提的自由;为别人着想的善良
5楼2014-02-21 14:14:33
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